カスタマイズされたブタのACTHはELISAのキット/副腎皮質刺激ホルモンELISAの試金のキットを挟みます

カスタマイズされたブタのACTHサンドイッチELISAキットの副腎皮質刺激ホルモンELISAの試金のキット
 
Cat.No E0185Po
 
試金の主義
このサンドイッチELISAキットは酵素つながれたImmunosorbentの試金（ELISA）です。版はブタのACTHの抗体とプリコートされました。サンプルで現在のACTHは加えられ、井戸で塗られる抗体に結合します。そしてbiotinylatedブタのACTHの抗体は加えられ、サンプルのACTHに結合します。それからStreptavidin-HRPは加えられ、BiotinylatedのACTHの抗体に結合します。孵化の後で解かれたStreptavidin-HRPは洗浄のステップの間に洗い流されます。基質の解決はそれから加えられ、色はブタのACTHの量に比例して成長します。反作用は酸性の付加で停止します解決を終わり、吸光度は450 nmで測定されます。
標準的なカーブの範囲:0.2ng/L - 60ng/L
感受性:0.093ng/L
サイズ:96の井戸
貯蔵:終わる6ヶ月の貯蔵のための2-8°C.で試薬を参照します有効期限を保ちます-20°C.のAvoidによって繰り返される雪解け周期でそれを貯えて下さい。個々の試薬が開けばキットが1か月以内に使用されることが推薦されます。
 
意図されていた使用
このサンドイッチ キットは血清、血しょう、細胞培養のsupernates、細胞のlysates、ティッシュのホモジュネートのブタの副腎皮質刺激ホルモン（別名ACTH）の正確で量的な検出のためです。 
*Thisプロダクトは研究の使用だけのために、ない診断のプロシージャの使用のためです。それは非常に使用の前にこの指示を完全に読むことを推薦しますあります。
 
注意

• 使用前に、サンドイッチELISAキットおよびサンプルは室温に30分自然に暖められるべきです。
• この指示は実験で厳しく続かれなければなりません。
• ストリップの望ましい数が取除かれたら、すぐに悪化から残を保護するために袋を封じ直して下さい。使用中場合のすべての試薬を覆って下さい。
• 試薬をピペットで移した場合付加の順序そして率を十分によからのピペットで移すMake sure。
• ピペットはひっくり返、手元の版のシーラーはクロス汚染を避けるためにきれい、使い捨て可能なべきです。
• 異なったバッチからの試薬を一緒に使用することを避けて下さい。
• 基質の解決Bは長い間つくためにライトに敏感、露出しません基質の解決Bをです。
• 解決を含んでいます酸を停止して下さい。この材料を使用した場合目、手および皮保護を身に着けて下さい。キットの試薬が付いている皮または粘膜の接触を避けて下さい。
• キットは有効期限を越えて使用されるべきではないです。

 
標本コレクション
血清は血清が室温で10-20分の間凝固するようにします。20分の2000-3000のRPMの遠心分離機。
 
血しょうは抗凝固薬としてエチレンジアミン四酢酸かヘパリンを使用して血しょうを集めます。2時で2000-3000のRPMで15分のためのサンプルを-コレクションの30分以内の8°C遠心分離機にかけて下さい。
 
尿は生殖不能の管によって集まります。およそ20分の2000-3000のRPMの遠心分離機。pleuroperitoneal流動および脳脊髄液を集めた場合、前述のプロシージャに続いて下さい。
 
細胞培養の上澄みは生殖不能の管によって検査するとき部品を分泌しなさい集まります。およそ20分の2000-3000のRPMで遠心分離機にかけて下さい。supernatantsを注意深く集めて下さい。細胞内の部品を検査した場合、およそ1 million/mlの細胞の集中に細胞の懸濁液を薄くするのにPBS （pH 7.2-7.4）を使用して下さい。中の部品を放つために繰り返された氷結雪解け周期を通して細胞を損なって下さい。およそ20分の2000-3000のRPMで遠心分離機にかけて下さい。
 
余分な血を完全に取除き、均質化の前に重量を量るべきPBS （pH 7.4）のティッシュの洗浄のティッシュ。ティッシュを細かく切り刻に、氷のガラス ホモジェナイザーとのPBS （pH7.4）の均質にして下さい。2-8°Cで分解するか、または-20°C.の遠心分離機でおよそ20分の2000-3000のRPMで凍らせて下さい。
 
*Sampleはこのキットと薄くすることができません。キットを準備するのに材料のために私達は使用しますサンプル マトリックス干渉は不当に試金の特定性そして正確さを弱めるかもしれません。
 
試薬の準備
すべての試薬は使用の前の室温に持って来られるべきです。
標準は標準の120μlを再構成します（80ng/L） 40ng/L標準貯蔵液を発生させる標準的な希釈剤の120μlと。標準が希薄を作る前に穏やかな撹拌の15分の間坐るようにして下さい。連続的に標準貯蔵液を薄くすることによって重複した標準的なポイントを準備して下さい（40ng/L） 20ng/L、10ng/L、5ng/Lおよび2.5ng/L解決を作り出す標準的な希釈剤との1:2。標準的な希釈剤はゼロ標準（0 ng/L）として役立ちます。どの残りの解決でも-20°Cで凍り、1か月以内に使用されるべきです。提案される標準ソリューションの希薄は次の通りあります:
 

 
洗浄緩衝1x洗浄緩衝の600のmlをもたらすために脱イオンされるへの洗浄緩衝濃縮物30xの希薄な20mlまたは蒸留水。水晶が濃縮物で形作ったら、水晶が完全に分解したまで穏やかの組合せ。
 
概要
1. すべての試薬、サンプルおよび標準を準備して下さい。
2. それぞれにサンプルおよびELISAの試薬をよく加えて下さい。37°C.で1時間孵化させて下さい。
3. 版を5回洗浄して下さい。
4. 37°C.で10分の基質の解決AおよびB. Incubateを加えて下さい。
5. 停止します解決を加えれば色は成長します。
6. 10分以内のODの価値を読んで下さい。