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実験室の研究の高精度および特定性のラットのGalectin 3のサンドイッチELISAのキット
Cat.No Eの1533のRA
標準的なカーブの範囲:0.05ng/ml - 20ng/ml
感受性:0.023ng/ml
サイズ:96の井戸
貯蔵:終わる6ヶ月の貯蔵のための2-8°C.で試薬を参照します有効期限を保ちます-20°C.のAvoidによって繰り返される雪解け周期でそれを貯えて下さい。個々の試薬が開けばキットが1か月以内に使用されることが推薦されます。
*Thisプロダクトは研究の使用だけのために、ない診断のプロシージャの使用のためです。それは非常に使用の前にこの指示を完全に読むことを推薦しますあります。
意図されていた使用
このサンドイッチ キットは血清、血しょう、細胞培養のsupernates、細胞のlysates、ティッシュのホモジュネートのラットGalectin 3 （別名GAL-3）の正確で量的な検出のためです。
提供される試薬
| 部品 | 量 |
| 標準ソリューション（24ng/ml） | 0.5ml x1 |
| プリコートされたELISAの版 | 12 * 8つの健康なストリップx1 |
| 標準的な希釈剤 | 3ml x1 |
| Streptavidin-HRP | 6ml x1 |
| 解決を停止して下さい | 6ml x1 |
| 基質の解決A | 6ml x1 |
| 基質の解決B | 6ml x1 |
| 洗浄緩衝濃縮物（30x） | 20ml x1 |
| BiotinylatedのラットGAL-3の抗体 | 1ml x1 |
| ユーザーの指示 | 1 |
| 版のシーラー | 2 pics |
| ジッパー袋 | 1つのpic |
注意
標本コレクション
血清は血清が室温で10-20分の間凝固するようにします。20分の2000-3000のRPMの遠心分離機。
血しょうは抗凝固薬としてエチレンジアミン四酢酸かヘパリンを使用して血しょうを集めます。2時で2000-3000のRPMで15分のためのサンプルを-コレクションの30分以内の8°C遠心分離機にかけて下さい。
尿は生殖不能の管によって集まります。およそ20分の2000-3000のRPMの遠心分離機。pleuroperitoneal流動および脳脊髄液を集めた場合、前述のプロシージャに続いて下さい。
細胞培養の上澄みは生殖不能の管によって検査するとき部品を分泌しなさい集まります。およそ20分の2000-3000のRPMで遠心分離機にかけて下さい。supernatantsを注意深く集めて下さい。細胞内の部品を検査した場合、およそ1 million/mlの細胞の集中に細胞の懸濁液を薄くするのにPBS （pH 7.2-7.4）を使用して下さい。中の部品を放つために繰り返された氷結雪解け周期を通して細胞を損なって下さい。およそ20分の2000-3000のRPMで遠心分離機にかけて下さい。
余分な血を完全に取除き、均質化の前に重量を量るべきPBS （pH 7.4）のティッシュの洗浄のティッシュ。ティッシュを細かく切り刻に、氷のガラス ホモジェナイザーとのPBS （pH7.4）の均質にして下さい。2-8°Cで分解するか、または-20°C.の遠心分離機でおよそ20分の2000-3000のRPMで凍らせて下さい。
*Sampleはこのキットと薄くすることができません。キットを準備するのに材料のために私達は使用しますサンプル マトリックス干渉は不当に試金の特定性そして正確さを弱めるかもしれません。
試薬の準備
すべての試薬は使用の前の室温に持って来られるべきです。
標準は12ng/ml標準貯蔵液を発生させるために標準的な希釈剤の120μlの標準（24ng/ml）の120μlを再構成します。標準が希薄を作る前に穏やかな撹拌の15分の間坐るようにして下さい。6ng/ml、3ng/ml、1.5ng/mlおよび0.75ng/ml解決を作り出すために連続的に標準的な希釈剤と標準貯蔵液（12ng/ml）の1:2を薄くすることによって重複した標準的なポイントを準備して下さい。標準的な希釈剤はゼロ標準（0 ng/ml）として役立ちます。どの残りの解決でも-20°Cで凍り、1か月以内に使用されるべきです。提案される標準ソリューションの希薄は次の通りあります:
| 12ng/ml | 標準的なNo.5 | 120μl元の標準+ 120μl標準の希釈剤 |
| 6ng/ml | 標準的なNo.4 | 標準120μl No.5 + 120μl標準の希釈剤 |
| 3ng/ml | 標準的なNo.3 | 標準120μl No.4 + 120μl標準の希釈剤 |
| 1.5ng/ml | 標準的なNo.2 | 標準120μl No.3 + 120μl標準の希釈剤 |
| 0.75ng/ml | 標準的なNo.1 | 標準120μl No.2 + 120μl標準の希釈剤 |
| 標準的な集中 | 標準的なNo.5 | 標準的なNo.4 | 標準的なNo.3 | 標準的なNo.2 | 標準的なNo.1 |
| 24ng/ml | 12ng/ml | 6ng/ml | 3ng/ml | 1.5ng/ml | 0.75ng/ml |
洗浄緩衝1x洗浄緩衝の500のmlをもたらすために脱イオンされるへの洗浄緩衝濃縮物30xの希薄な20mlまたは蒸留水。水晶が濃縮物で形作ったら、水晶が完全に分解したまで穏やかの組合せ。
概要
1. すべての試薬、サンプルおよび標準を準備して下さい。
2. それぞれにサンプルおよびELISAの試薬をよく加えて下さい。37°C.で1時間孵化させて下さい。
3. 版を5回洗浄して下さい。
4. 37°C.で10分の基質の解決AおよびB. Incubateを加えて下さい。
5. 停止します解決を加えれば色は成長します。
6. 10分以内のODの価値を読んで下さい。
結果の計算
標準的なカーブを横の（x）軸線の集中に対して縦の（y）軸線で標準それぞれのための平均ODの計画によって組み立て、グラフのポイントを通した最もよい適合のカーブを引いて下さい。これらの計算はコンピュータ ベースのカーブ付属品ソフトウェアと最もよく行い、最もよい適合ラインは回帰分析によって定めることができます。
Referances
「Galectin-3 ischemic脳障害に応じて、ないaxotomy顔面神経にmicroglial細胞でupregulated」。は
Walther M.、Kuklinski S.、Pesheva P.、Guntinas-Lichius O.、Angelov D.N.、Neiss W.F.、Asou H.、Probstmeier R。
J. Neurosci。Res.61:430- 435(2000)