正確で量的な検出のための実験室CYP1A2人間ELISAのキットE2281Hu

実験室の研究CYP1A2正確で量的な検出96の井戸の版のための人間ELISAの試金のキット

Cat.No E2281Hu

試薬の準備

すべての試薬は使用の前の室温に持って来られるべきです。

標準は標準の120μlを再構成します（2400ng/L） 1200ng/L標準貯蔵液を発生させる標準的な希釈剤の120μlと。標準が希薄を作る前に穏やかな撹拌の15分の間坐るようにして下さい。連続的に標準貯蔵液を薄くすることによって重複した標準的なポイントを準備して下さい（1200ng/L） 600ng/L、300ng/L、150ng/Lおよび75ng/L解決を作り出す標準的な希釈剤との1:2。標準的な希釈剤はゼロ標準（0 ng/L）として役立ちます。どの残りの解決でも-20°Cで凍り、1か月以内に使用されるべきです。提案される標準ソリューションの希薄は次の通りあります:

洗浄緩衝1x洗浄緩衝の500のmlをもたらすために脱イオンされるへの洗浄緩衝濃縮物25xの希薄な20mlまたは蒸留水。水晶が濃縮物で形作ったら、水晶が完全に分解したまで穏やかの組合せ。

サイズ:96の井戸

貯蔵:終わる6ヶ月の貯蔵のための2-8°C.で試薬を参照します有効期限を保ちます-20°C.のAvoidによって繰り返される雪解け周期でそれを貯えて下さい。個々の試薬が開けばキットが1か月以内に使用されることが推薦されます。

*Thisプロダクトは研究の使用だけのために、ない診断のプロシージャの使用のためです。それは非常に使用の前にこの指示を完全に読むことを推薦しますあります。

精密

内部試金の精密（試金内の精密）は1つの版で知られていた集中の3つのサンプル内部試金の精密を査定するためにテストされました。

相互試金の精密（試金間の精密）は別の試金で知られていた集中の3つのサンプル相互試金の精密を査定するためにテストされました。

CV （%） = SD/mean X 100

内部試金:CV<8>

相互試金:CV<10>

意図されていた使用

このサンドイッチ キットは血清、血しょう、細胞培養のsupernates、細胞のlysates、ティッシュのホモジュネートの人間のチトクロームP450 1A2 （別名CYP1A2）の正確で量的な検出のためです。

試金の主義

このサンドイッチelisaのキットは酵素つながれたImmunosorbentの試金（ELISA）です。版は人間CYP1A2抗体とプリコートされました。CYP1A2はサンプルで加えられ、井戸で塗られる抗体に結合します示します。そしてbiotinylated人間CYP1A2抗体は加えられ、サンプルのCYP1A2に結合します。それからStreptavidin-HRPは加えられ、Biotinylated CYP1A2の抗体に結合します。孵化の後で解かれたStreptavidin-HRPは洗浄のステップの間に洗い流されます。基質の解決はそれから加えられ、色は人間CYP1A2の量に比例して成長します。反作用は酸性の付加で停止します解決を終わり、吸光度は450 nmで測定されます。

注意

• 使用前に、サンドイッチelisaのキットおよびサンプルは室温に30分自然に暖められるべきです。
• この指示は実験で厳しく続かれなければなりません。
• ストリップの望ましい数が取除かれたら、すぐに悪化から残を保護するために袋を封じ直して下さい。使用中場合のすべての試薬を覆って下さい。
• 試薬をピペットで移した場合付加の順序そして率を十分によからのピペットで移すMake sure。
• ピペットはひっくり返、手元の版のシーラーはクロス汚染を避けるためにきれい、使い捨て可能なべきです。
• 異なったバッチからの試薬を一緒に使用することを避けて下さい。
• 基質の解決Bは長い間つくためにライトに敏感、露出しません基質の解決Bをです。
• 解決を含んでいます酸を停止して下さい。この材料を使用した場合目、手および皮保護を身に着けて下さい。キットの試薬が付いている皮または粘膜の接触を避けて下さい。
• サンドイッチelisaのキットは有効期限を越えて使用されるべきではないです。

概要

1. すべての試薬、サンプルおよび標準を準備して下さい。

2. それぞれにサンプルおよびELISAの試薬をよく加えて下さい。37°C.で1時間孵化させて下さい。

3. 版を5回洗浄して下さい。

4. 37°C.で10分の基質の解決AおよびB. Incubateを加えて下さい。

5. 停止します解決を加えれば色は成長します。

6. 10分以内のODの価値を読んで下さい。

結果の計算

標準的なカーブを横の（x）軸線の集中に対して縦の（y）軸線で標準それぞれのための平均ODの計画によって組み立て、グラフのポイントを通した最もよい適合のカーブを引いて下さい。これらの計算はコンピュータ ベースのカーブ付属品ソフトウェアと最もよく行い、最もよい適合ラインは回帰分析によって定めることができます。