人間のアルプスの高い特定性および感受性のためのELISAのキット

人間のアルプスの高い特定性および感受性のためのELISAのキット

Cat.No E0813Hu

標準的なカーブの範囲:2IU/L - 600IU/L

感受性:1.12IU/L

意図されていた使用

このサンドイッチ キットは血清、血しょう、細胞培養のsupernates、細胞のlysates、ティッシュのホモジュネートの人間のアルカリ ホスファターゼ（別名アルプス）の正確で量的な検出のためです。

試金の主義

このキットは酵素つながれたImmunosorbentの試金（ELISA）です。版は人間のアルプスの抗体とプリコートされました。サンプルで現在のアルプスは加えられ、井戸で塗られる抗体に結合します。そしてbiotinylated人間のアルプスの抗体は加えられ、サンプルのアルプスに結合します。それからStreptavidin-HRPは加えられ、Biotinylatedのアルプスの抗体に結合します。孵化の後で解かれたStreptavidin-HRPは洗浄のステップの間に洗い流されます。基質の解決はそれから加えられ、色は人間のアルプスの量に比例して成長します。反作用は酸性の付加で停止します解決を終わり、吸光度は450 nmで測定されます。

提供される試薬

必要なが、供給されない材料

• 37°C±0.5°C定温器
• 吸収性のペーパー
• 精密ピペットおよび使い捨て可能なピペットの先端
• 管をきれいにして下さい
• 脱イオンされるまたは蒸留水
• 450 ± 10nmの波長フィルターを持つMicroplateの読者

注意

• 使用前に、キットおよびサンプルは室温に30分自然に暖められるべきです。
• この指示は実験で厳しく続かれなければなりません。
• ストリップの望ましい数が取除かれたら、すぐに悪化から残を保護するために袋を封じ直して下さい。使用中場合のすべての試薬を覆って下さい。
• 試薬をピペットで移した場合付加の順序そして率を十分によからのピペットで移すMake sure。
• ピペットはひっくり返、手元の版のシーラーはクロス汚染を避けるためにきれい、使い捨て可能なべきです。
• 異なったバッチからの試薬を一緒に使用することを避けて下さい。
• 基質の解決Bは長い間つくためにライトに敏感、露出しません基質の解決Bをです。
• 解決を含んでいます酸を停止して下さい。この材料を使用した場合目、手および皮保護を身に着けて下さい。キットの試薬が付いている皮または粘膜の接触を避けて下さい。
• キットは有効期限を越えて使用されるべきではないです。

試薬の準備

すべての試薬は使用の前の室温に持って来られるべきです。

標準は標準の120μlを再構成します（800IU/L） 400IU/L標準貯蔵液を発生させる標準的な希釈剤の120μlと。標準が希薄を作る前に穏やかな撹拌の15分の間坐るようにして下さい。連続的に標準貯蔵液を薄くすることによって重複した標準的なポイントを準備して下さい（400IU/L） 200IU/L、100IU/L、50IU/Lおよび25IU/L解決を作り出す標準的な希釈剤との1:2。標準的な希釈剤はゼロ標準（0 IU/L）として役立ちます。どの残りの解決でも-20°Cで凍り、1か月以内に使用されるべきです。提案される標準ソリューションの希薄は次の通りあります:

洗浄緩衝1x洗浄緩衝の500のmlをもたらすために脱イオンされるへの洗浄緩衝濃縮物30xの希薄な20mlまたは蒸留水。水晶が濃縮物で形作ったら、水晶が完全に分解したまで穏やかの組合せ。

概要

1. すべての試薬、サンプルおよび標準を準備して下さい。

2. それぞれにサンプルおよびELISAの試薬をよく加えて下さい。37°C.で1時間孵化させて下さい。

3. 版を5回洗浄して下さい。

4. 37°C.で10分の基質の解決AおよびB. Incubateを加えて下さい。

5. 停止します解決を加えれば色は成長します。

6. 10分以内のODの価値を読んで下さい。

結果の計算

標準的なカーブを横の（x）軸線の集中に対して縦の（y）軸線で標準それぞれのための平均ODの計画によって組み立て、グラフのポイントを通した最もよい適合のカーブを引いて下さい。これらの計算はコンピュータ ベースのカーブ付属品ソフトウェアと最もよく行い、最もよい適合ラインは回帰分析によって定めることができます。