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ホルモンCRH ELISAのキットを解放している96 Wellsによってカスタマイズされる人間Corticotropin
Cat.No E1000のHu
標準的なカーブの範囲:1ng/ml - 40ng/ml
感受性:0.53ng/ml
サイズ:96の井戸
貯蔵:終わる6ヶ月の貯蔵のための2-8°C.で試薬を参照します有効期限を保ちます-20°C.のAvoidによって繰り返される雪解け周期でそれを貯えて下さい。個々の試薬が開けばキットが1か月以内に使用されることが推薦されます。
試金の主義
このキットは酵素つながれたImmunosorbentの試金(ELISA)です。版は人間CRHの抗体とプリコートされました。CRHはサンプルで加えられ、井戸で塗られる抗体に結合します示します。そしてbiotinylated人間CRHの抗体は加えられ、サンプルのCRHに結合します。それからStreptavidin-HRPは加えられ、Biotinylated CRHの抗体に結合します。孵化の後で解かれたStreptavidin-HRPは洗浄のステップの間に洗い流されます。基質の解決はそれから加えられ、色は人間CRHの量に比例して成長します。反作用は酸性の付加で停止します解決を終わり、吸光度は450 nmで測定されます。
提供される試薬
部品 | 量 |
標準ソリューション(40ng/ml) | 0.5ml x1 |
プリコートされたELISAの版 | 12 * 8つの健康なストリップx1 |
標準的な希釈剤 | 3ml x1 |
Streptavidin-HRP | 6ml x1 |
解決を停止して下さい | 6ml x1 |
基質の解決A | 6ml x1 |
基質の解決B | 6ml x1 |
洗浄緩衝濃縮物(30x) | 20ml x1 |
Biotinylated人間CRHの抗体 | 1ml x1 |
ユーザーの指示 | 1 |
版のシーラー | 2 pics |
ジッパー袋 | 1つのpic |
試薬の準備
すべての試薬は使用の前の室温に持って来られるべきです。標準は20ng/ml標準貯蔵液を発生させるために標準的な希釈剤の120μlの標準(40ng/ml)の120μlを再構成します。標準が希薄を作る前に穏やかな撹拌の15分の間坐るようにして下さい。10ng/ml、5ng/ml、2.5ng/mlおよび1.25ng/ml解決を作り出すために連続的に標準的な希釈剤と標準貯蔵液(20ng/ml)の1:2を薄くすることによって重複した標準的なポイントを準備して下さい。標準的な希釈剤はゼロ標準(0 ng/ml)として役立ちます。どの残りの解決でも-20℃で凍り、1か月以内に使用されるべきです。提案される標準ソリューションの希薄は次の通りあります:
20ng/ml | 標準的なNo.5 | 120μl元の標準+ 120μl標準の希釈剤 |
10ng/ml | 標準的なNo.4 | 標準120μl No.5 + 120μl標準の希釈剤 |
5ng/ml | 標準的なNo.3 | 標準120μl No.4 + 120μl標準の希釈剤 |
2.5ng/ml | 標準的なNo.2 | 標準120μl No.3 + 120μl標準の希釈剤 |
1.25ng/ml | 標準的なNo.1 | 標準120μl No.2 + 120μl標準の希釈剤 |
標準的な集中 | 標準的なNo.5 | 標準的なNo.4 | 標準的なNo.3 | 標準的なNo.2 | 標準的なNo.1 |
40ng/ml | 20ng/ml | 10ng/ml | 5ng/ml | 2.5ng/ml | 1.25ng/ml |
洗浄緩衝1x洗浄緩衝の500のmlをもたらすために脱イオンされるへの洗浄緩衝濃縮物30xの希薄な20mlまたは蒸留水。水晶が濃縮物で形作ったら、水晶が完全に分解したまで穏やかの組合せ。
概要
1. すべての試薬、サンプルおよび標準を準備して下さい。
2. それぞれにサンプルおよびELISAの試薬をよく加えて下さい。37°C.で1時間孵化させて下さい。
3. 版を5回洗浄して下さい。
4. 37°C.で10分の基質の解決AおよびB. Incubateを加えて下さい。
5. 停止します解決を加えれば色は成長します。
6. 10分以内のODの価値を読んで下さい。
結果の計算
標準的なカーブを横の(x)軸線の集中に対して縦の(y)軸線で標準それぞれのための平均ODの計画によって組み立て、グラフのポイントを通した最もよい適合のカーブを引いて下さい。これらの計算はコンピュータ ベースのカーブ付属品ソフトウェアと最もよく行い、最もよい適合ラインは回帰分析によって定めることができます。