強い感受性人間ELISAのキットHRH4の免疫学的検定テスト キットは時間2時間のと試金のカスタマイズした

強い感受性人間ELISAのキットHRH4の免疫学的検定テスト キットは時間2時間のと試金のカスタマイズした

試金の主義

このelisaテスト キットは酵素つながれたImmunosorbentの試金（ELISA）である。版は人間HRH4抗体とプリコートされた。サンプルのHRH4現在は加えられ、抗体への縛りは井戸で塗られる。そしてbiotinylated人間HRH4抗体はサンプルのHRH4に縛り加えられ。それからStreptavidin-HRPは加えられ、Biotinylated HRH4の抗体に結合する。孵化によって解かれるStreptavidin-HRPが洗浄のステップの間に洗い流された後。基質の解決はそれから加えられ、色は人間HRH4の量に比例して成長する。反作用は酸性の付加で停止する解決を終わり、吸光度は450 nmで測定される。

貯蔵:2-8°C.で試薬を貯えなさい。6ヶ月の貯蔵のために-20°C.でそれを保つために有効期限を参照しなさい。Avoid雪解け周期を繰り返した。個々の試薬が開けばキットが1か月以内に使用されることが推薦される。

*Thisプロダクトは研究の使用だけのために、ない診断のプロシージャの使用のためである。それは非常に使用の前にこの指示を完全に読むことを推薦するある。

精密

内部試金の精密（試金内の精密）は1つの版で知られていた集中の3つのサンプル内部試金の精密を査定するためにテストされた。

相互試金の精密（試金間の精密）は別の試金で知られていた集中の3つのサンプル相互試金の精密を査定するためにテストされた。

CV （%） = SD/mean X 100

内部試金:CV<8%

相互試金:CV<10%

注意

• 使用前に、elisaテスト キットおよびサンプルは室温に30分自然に暖められるべきである。
• この指示は実験で厳しく続かれなければならない。
• ストリップの望ましい数が取除かれたら、すぐに悪化から残るために保護するように袋を封じ直しなさい。使用中場合のすべての試薬を覆いなさい。
• いつ試薬をピペットで移すこと十分によからの付加の順序そして率をピペットで移すMake sure。
• 手元のピペットの先端そして版のシーラーはクロス汚染を避けるためにきれい、使い捨て可能なべきである。
• 異なったバッチからの試薬を一緒に使用することを避けなさい。
• 基質の解決Bは長い間つくためにライトに敏感、露出しない基質の解決Bをである。
• 解決を含んでいる酸を停止しなさい。この材料を使用した場合目、手および皮保護を身に着けなさい。キットの試薬が付いている皮または粘膜の接触を避けなさい。
• elisaテスト キットは有効期限を越えて使用されるべきではない。

標本コレクション

血清は血清が室温で10-20分の間凝固するようにする。20分の2000-3000のRPMの遠心分離機。

血しょうは抗凝固薬としてエチレンジアミン四酢酸かヘパリンを使用して血しょうを集める。2時の2000-3000のRPMの15分の遠心分離機のサンプル-コレクションの30分以内の8°C。

尿は生殖不能の管によって集まる。およそ20分の2000-3000のRPMの遠心分離機。pleuroperitoneal液体および脳脊髄液を集めた場合、前述のプロシージャに続きなさい。

細胞培養の上澄みは生殖不能の管によって部品を分泌するために検査するとき集まる。およそ20分の2000-3000のRPMの遠心分離機。supernatantsを注意深く集めなさい。細胞内の部品を検査した場合、およそ1 million/mlの細胞の集中に細胞の懸濁液を薄くする使用PBS （pH 7.2-7.4）。中の部品を放つ繰り返されたfreeze-thaw周期を通した損傷の細胞。およそ20分の2000-3000のRPMの遠心分離機。

ティッシュおよび他の体液は余分な血を完全に取除き、均質化の前に重量を量るためにPBS （pH 7.4）のティッシュを洗う。ティッシュを細かく切り刻に、氷のガラス ホモジェナイザーとのPBS （pH7.4）の均質にしなさい。2-8°Cの雪解けかおよそ20分の2000-3000のRPMの-20°C.の遠心分離機の氷結。

ノート

• サンプル集中は試金で使用される前に予測されるべきである。サンプル集中が標準的なカーブの範囲の内になければ、ユーザーは彼らの特定の実験のための最適のサンプルを定めるために私達に連絡しなければならない。
• 5日以内に使用されるべきサンプルは2-8°C.サンプルでaliquotedべきまたは1か月以内の-20°Cか6か月以内の-80°Cで貯えられなければならない貯えられるべきである。Avoid氷結の雪解け周期を繰り返した。
• サンプルは試金を始める前の室温に持って来られるべきである。
• 使用の前にサンプルを集めるために遠心分離機にかけなさい。
• NaN3を含んでいるサンプルはホース ラディッシュの過酸化酵素（HRP）の活動を禁じると同時にテストすることができない。
• supernatantsを注意深く集めなさい。沈殿物が貯蔵の間に起こったときに、遠心分離は再度行われるべきである。
• 溶血は試験結果の妥当性に非常に影響を与えることができる。溶血を最小にするために心配を取りなさい。

*Sampleはこのキットと薄くすることができない。キットを準備するのに材料のために私達は使用するサンプル マトリックス干渉は不当に試金の特定性そして正確さを弱めるかもしれない。

概要

1. すべての試薬、サンプルおよび標準を準備しなさい。

2. 各井戸にサンプルおよびELISAの試薬を加えなさい。37°C.で1時間孵化させなさい。

3. 版を5回洗浄しなさい。

4. 37°C.で10分の基質の解決AおよびB. Incubateを加えなさい。

5. 停止する解決を加えれば色は成長する。

6. 10分以内のODの価値を読みなさい。

結果の計算

横の（x）軸線の集中に対して縦の（y）軸線の各標準のための平均ODの計画によって標準的なカーブをグラフのポイントを通した最もよく適当なカーブを引くために組み立てれば。これらの計算はコンピュータ ベースのカーブ付属品ソフトウェアと最もよく行い、最もよく適当なラインは回帰分析によって定めることができる。