カスタマイズされた96健康な版人間ELISAのキットAngiopoietin 4 2 - 8°C貯蔵OEM

人間の強い感受性および特定性のAngiopoietin 4のサンドイッチELISAのキットは96健康な版をカスタマイズした
 
Cat.No E1263Hu
標準的なカーブの範囲:15ng/L - 3000ng/L
感受性:7.73ng/L
サイズ:96の井戸
 
試金の主義
このelisaテスト キットは酵素つながれたImmunosorbentの試金（ELISA）である。版は人間ANG-4抗体とプリコートされた。サンプルのANG-4現在は加えられ、抗体への縛りは井戸で塗られる。そしてbiotinylated人間ANG-4抗体はサンプルのANG-4に縛り加えられ。それからStreptavidin-HRPは加えられ、Biotinylated ANG-4の抗体に結合する。孵化によって解かれるStreptavidin-HRPが洗浄のステップの間に洗い流された後。基質の解決はそれから加えられ、色は人間ANG-4の量に比例して成長する。反作用は酸性の付加で停止する解決を終わり、吸光度は450 nmで測定される。
 
*Thisプロダクトは研究の使用だけのために、ない診断のプロシージャの使用のためである。それは非常に使用の前にこの指示を完全に読むことを推薦するある。
 
注意

• 使用前に、elisaテスト キットおよびサンプルは室温に30分自然に暖められるべきである。
• この指示は実験で厳しく続かれなければならない。
• ストリップの望ましい数が取除かれたら、すぐに悪化から残るために保護するように袋を封じ直しなさい。使用中場合のすべての試薬を覆いなさい。
• いつ試薬をピペットで移すこと十分によからの付加の順序そして率をピペットで移すMake sure。
• 手元のピペットの先端そして版のシーラーはクロス汚染を避けるためにきれい、使い捨て可能なべきである。
• 異なったバッチからの試薬を一緒に使用することを避けなさい。
• 基質の解決Bは長い間つくためにライトに敏感、露出しない基質の解決Bをである。
• 解決を含んでいる酸を停止しなさい。この材料を使用した場合目、手および皮保護を身に着けなさい。キットの試薬が付いている皮または粘膜の接触を避けなさい。
• elisaテスト キットは有効期限を越えて使用されるべきではない。

 
試薬の準備
すべての試薬は使用の前の室温に持って来られるべきである。
標準は標準の120μlを再構成する（3200ng/L） 1600ng/L標準貯蔵液を発生させる標準的な希釈剤の120μlと。標準が希薄を作る前に穏やかな撹拌の15分の間坐るようにしなさい。連続的に標準貯蔵液を薄くすることによって重複した標準的なポイントを準備しなさい（1600ng/L） 800ng/L、400ng/L、200ng/Lおよび100ng/L解決を作り出す標準的な希釈剤との1:2。ゼロの標準（0 ng/L）として標準的な希釈剤のサーブ。どの残りの解決でも-20°Cで凍り、1か月以内に使用されるべきである。提案される標準ソリューションの希薄は次の通りある:
 

 
洗浄緩衝1x洗浄緩衝の500のmlをもたらすために脱イオンされるへの洗浄緩衝濃縮物25xの希薄な20mlまたは蒸留水。水晶が濃縮物で形作ったら、水晶が完全に分解したまで穏やかの組合せ。
 
試金プロシージャ
1.指示されるようにすべての試薬、標準ソリューションおよびサンプルを準備しなさい。使用の前に室温にすべての試薬を持って来なさい。試金は室温で行われる。
2.試金に必要なストリップの数を定めなさい。使用のためのフレームでストリップを挿入しなさい。未使用のストリップは2-8°C.で貯えられるべきである。
3.標準に50μl標準をよく加えなさい。注:標準ソリューションがbiotinylated抗体を含んでいるので標準に抗体をよく加えてはいけない。
次に4. 40μlサンプルをサンプル井戸に加え、サンプル井戸に10μl反ANG 4の抗体を加え、そしてサンプル井戸および標準的な井戸（よのない空白制御）に50μl streptavidin-HRPを加えなさい。よく混合しなさい。シーラーで版を覆いなさい。37°C.で60分を孵化させなさい。
5.シーラーを取除き、5回版を洗浄緩衝との洗浄しなさい。30秒から各ワシントン州の1分の少なくとも0.35 mlの洗浄緩衝に井戸を浸しなさい。自動化された洗浄のために、すべての井戸を吸い出し、洗浄緩衝が付いている井戸を入れ過ぎる洗浄緩衝との5回を洗浄しなさい。ペーパー タオルまたは他の吸収性材料に版にしみを付けなさい。
6. 50μl基質の解決Aを各井戸に加え、次に各井戸に50μl基質の解決Bを加えなさい。暗闇の37°Cで10分の新しいシーラーで覆われる版を孵化させなさい。
7. 50μlを停止する各井戸に解決を、青い色すぐに変わる黄色に加えなさい。
8.停止解決を加えた後10のメヌエットの内の450 nmにmicroplateの読者セットを使用してすぐによくそれぞれの光学濃度（ODの価値）を定めなさい。
 
概要
1.すべての試薬、サンプルおよび標準を準備しなさい。
2.各井戸にサンプルおよびELISAの試薬を加えなさい。37°C.で1時間孵化させなさい。
3.洗浄版5回。
4. 37°C.で10分の基質の解決AおよびB. Incubateを加えなさい。
5.停止する解決を加えれば色は成長する。
6. 10分以内のODの価値を読みなさい。
 
結果の計算
横の（x）軸線の集中に対して縦の（y）軸線の各標準のための平均ODの計画によって標準的なカーブをグラフのポイントを通した最もよく適当なカーブを引くために組み立てれば。これらの計算はコンピュータ ベースのカーブ付属品ソフトウェアと最もよく行い、最もよく適当なラインは回帰分析によって定めることができる。