研究のための犬の物質P ELISAの試金のキットの免疫学的検定テスト キット

96 Wellsは高精度および特定性の研究のための犬の物質P ELISAの試金のキットを大きさで分類する

Cat.No E0288Ca

*Thisプロダクトは研究の使用だけのために、ない診断のプロシージャの使用のためである。それは非常に使用の前にこの指示を完全に読むことを推薦するある。

試薬の準備

すべての試薬は使用の前の室温に持って来られるべきである。

標準は40ng/ml標準貯蔵液を発生させるために標準的な希釈剤の120μlの標準（80ng/ml）の120μlを再構成する。標準が希薄を作る前に穏やかな撹拌の15分の間坐るようにしなさい。20ng/ml、10ng/ml、5ng/mlおよび2.5ng/ml解決を作り出すために連続的に標準的な希釈剤と標準貯蔵液（40ng/ml）の1:2を薄くすることによって重複した標準的なポイントを準備しなさい。ゼロの標準（0 ng/ml）として標準的な希釈剤のサーブ。どの残りの解決でも-20°Cで凍り、1か月以内に使用されるべきである。提案される標準ソリューションの希薄は次の通りある:

洗浄緩衝1x洗浄緩衝の500のmlをもたらすために脱イオンされるへの洗浄緩衝濃縮物25xの希薄な20mlまたは蒸留水。水晶が濃縮物で形作ったら、水晶が完全に分解したまで穏やかの組合せ。

意図されていた使用

このサンドイッチ キットは血清、血しょう、細胞培養のsupernates、細胞のlysates、ティッシュのホモジュネートの犬の物質P （別名SP）の正確で量的な検出のためである。

試金の主義

このelisaの試金のキットは酵素つながれたImmunosorbentの試金（ELISA）である。版は犬SPの抗体とプリコートされた。サンプルのSPの現在は加えられ、抗体への縛りは井戸で塗られる。そしてbiotinylated犬SPの抗体はサンプルのSPに縛り加えられ。それからStreptavidin-HRPは加えられ、Biotinylated SPの抗体に結合する。孵化によって解かれるStreptavidin-HRPが洗浄のステップの間に洗い流された後。基質の解決はそれから加えられ、色は犬SPの量に比例して成長する。反作用は酸性の付加で停止する解決を終わり、吸光度は450 nmで測定される。

注意

• 使用前に、elisaの試金のキットおよびサンプルは室温に30分自然に暖められるべきである。
• この指示は実験で厳しく続かれなければならない。
• ストリップの望ましい数が取除かれたら、すぐに悪化から残るために保護するように袋を封じ直しなさい。使用中場合のすべての試薬を覆いなさい。
• いつ試薬をピペットで移すこと十分によからの付加の順序そして率をピペットで移すMake sure。
• 手元のピペットの先端そして版のシーラーはクロス汚染を避けるためにきれい、使い捨て可能なべきである。
• 異なったバッチからの試薬を一緒に使用することを避けなさい。
• 基質の解決Bは長い間つくためにライトに敏感、露出しない基質の解決Bをである。
• 解決を含んでいる酸を停止しなさい。この材料を使用した場合目、手および皮保護を身に着けなさい。キットの試薬が付いている皮または粘膜の接触を避けなさい。
• elisaの試金のキットは有効期限を越えて使用されるべきではない。

試金プロシージャ

1. 指示されるようにすべての試薬、標準ソリューションおよびサンプルを準備しなさい。使用の前に室温にすべての試薬を持って来なさい。試金は室温で行われる。

2. 試金に必要なストリップの数を定めなさい。使用のためのフレームでストリップを挿入しなさい。未使用のストリップは2-8°C.で貯えられるべきである。

3. 標準に50μl標準をよく加えなさい。注:標準ソリューションがbiotinylated抗体を含んでいるので標準に抗体をよく加えてはいけない。

4. 井戸を見本抽出するために40μlサンプルを加え、次にサンプル井戸に10μl反SPの抗体を加えなさい、次にサンプル井戸および標準的な井戸（よのない空白制御）に50μl streptavidin-HRPを加えなさい。よく混合しなさい。シーラーで版を覆いなさい。37°C.で60分を孵化させなさい。

5. シーラーを取除き、5回版を洗浄緩衝との洗浄しなさい。30秒から各ワシントン州の1分の少なくとも0.35 mlの洗浄緩衝に井戸を浸しなさい。自動化された洗浄のために、すべての井戸を吸い出し、洗浄緩衝が付いている井戸を入れ過ぎる洗浄緩衝との5回を洗浄しなさい。ペーパー タオルまたは他の吸収性材料に版にしみを付けなさい。

6. 50μl基質の解決Aを各井戸に加え、次に各井戸に50μl基質の解決Bを加えなさい。暗闇の37°Cで10分の新しいシーラーで覆われる版を孵化させなさい。

7. 50μlを停止する各井戸に解決を、青い色すぐに変わる黄色に加えなさい。

8. 停止解決を加えた後10のメヌエットの内の450 nmにmicroplateの読者セットを使用してすぐによくそれぞれの光学濃度（ODの価値）を定めなさい。