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実験室の研究のウシの高精度および感受性BHBA ELISAの試金のキット96の健康な版
Cat.No E0267Bo
意図されていた使用
このサンドイッチ キットは血清、血しょう、細胞培養のsupernates、細胞のlysates、ティッシュのホモジュネートの牛のようなベータhydroxybutyric酸(別名BHBA)の正確で量的な検出のためである。
精密
内部試金の精密(試金内の精密)は1つの版で知られていた集中の3つのサンプル内部試金の精密を査定するためにテストされた。
相互試金の精密(試金間の精密)は別の試金で知られていた集中の3つのサンプル相互試金の精密を査定するためにテストされた。
CV (%) = SD/mean X 100
内部試金:CV<8%
相互試金:CV<10%
試金の主義
このELISAの試金のキットは酵素つながれたImmunosorbentの試金(ELISA)である。版は牛のようなBHBAの抗体とプリコートされた。サンプルのBHBAの現在は加えられ、抗体への縛りは井戸で塗られる。そしてbiotinylated牛のようなBHBAの抗体はサンプルのBHBAに縛り加えられ。それからStreptavidin-HRPは加えられ、Biotinylated BHBAの抗体に結合する。孵化によって解かれるStreptavidin-HRPが洗浄のステップの間に洗い流された後。基質の解決はそれから加えられ、色は牛のようなBHBAの量に比例して成長する。反作用は酸性の付加で停止する解決を終わり、吸光度は450 nmで測定される。
提供される試薬
部品 | 量 |
標準ソリューション(4800nmol/ml) | 0.5ml x1 |
プリコートされたELISAの版 | 12 * 8つの健康なストリップx1 |
標準的な希釈剤 | 3ml x1 |
Streptavidin-HRP | 6ml x1 |
解決を停止しなさい | 6ml x1 |
基質の解決A | 6ml x1 |
基質の解決B | 6ml x1 |
洗浄緩衝濃縮物(30x) | 20ml x1 |
Biotinylated牛のようなBHBAの抗体 | 1ml x1 |
ユーザーの指示 | 1 |
版のシーラー | 2 pics |
ジッパー袋 | 1つのpic |
物質的な要求されるが、供給されない
注意
試薬の準備
すべての試薬は使用の前の室温に持って来られるべきである。
標準は2400nmol/ml標準貯蔵液を発生させるために標準的な希釈剤の120μlの標準(4800nmol/ml)の120μlを再構成する。標準が希薄を作る前に穏やかな撹拌の15分の間坐るようにしなさい。1200nmol/ml、600nmol/ml、300nmol/mlおよび150nmol/ml解決を作り出すために連続的に標準的な希釈剤と標準貯蔵液(2400nmol/ml)の1:2を薄くすることによって重複した標準的なポイントを準備しなさい。ゼロの標準(0 nmol/ml)として標準的な希釈剤のサーブ。どの残りの解決でも-20°Cで凍り、1か月以内に使用されるべきである。提案される標準ソリューションの希薄は次の通りある:
2400nmol/ml | 標準的なNo.5 | 120μl元の標準+ 120μl標準的な希釈剤 |
1200nmol/ml | 標準的なNo.4 | 標準120μl No.5 + 120μl標準的な希釈剤 |
600nmol/ml | 標準的なNo.3 | 標準120μl No.4 + 120μl標準的な希釈剤 |
300nmol/ml | 標準的なNo.2 | 標準120μl No.3 + 120μl標準的な希釈剤 |
150nmol/ml | 標準的なNo.1 | 標準120μl No.2 + 120μl標準的な希釈剤 |
標準的な集中 | 標準的なNo.5 | 標準的なNo.4 | 標準的なNo.3 | 標準的なNo.2 | 標準的なNo.1 |
4800nmol/ml | 2400nmol/ml | 1200nmol/ml | 600nmol/ml | 300nmol/ml | 150nmol/ml |
洗浄緩衝1x洗浄緩衝の600のmlをもたらすために脱イオンされるへの洗浄緩衝濃縮物30xの希薄な20mlまたは蒸留水。水晶が濃縮物で形作ったら、水晶が完全に分解したまで穏やかの組合せ。
概要
1. すべての試薬、サンプルおよび標準を準備しなさい。
2. 各井戸にサンプルおよびELISAの試薬を加えなさい。37°C.で1時間孵化させなさい。
3. 版を5回洗浄しなさい。
4. 37°C.で10分の基質の解決AおよびB. Incubateを加えなさい。
5. 停止する解決を加えれば色は成長する。
6. 10分以内のODの価値を読みなさい。