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96 Wellsのサイズの高い感受性および特定性の牛のようなプロラクチンPRLサンドイッチ免疫学的検定テスト キット
Cat.No E0237Bo
感受性:1.15ng/ml
標準的なカーブの範囲:2ng/ml - 600ng/ml
*Thisプロダクトは研究の使用だけのために、ない診断のプロシージャの使用のためである。それは非常に使用の前にこの指示を完全に読むことを推薦するある。
試金の主義
このELISAテスト キットは酵素つながれたImmunosorbentの試金(ELISA)である。版は牛のようなPRLの抗体とプリコートされた。サンプルのPRLの現在は加えられ、抗体への縛りは井戸で塗られる。そしてbiotinylated牛のようなPRLの抗体はサンプルのPRLに縛り加えられ。それからStreptavidin-HRPは加えられ、Biotinylated PRLの抗体に結合する。孵化によって解かれるStreptavidin-HRPが洗浄のステップの間に洗い流された後。基質の解決はそれから加えられ、色は牛のようなPRLの量に比例して成長する。反作用は酸性の付加で停止する解決を終わり、吸光度は450 nmで測定される。
提供される試薬
部品 | 量 |
標準ソリューション(800ng/ml) | 0.5ml x1 |
プリコートされたELISAの版 | 12 * 8つの健康なストリップx1 |
標準的な希釈剤 | 3ml x1 |
Streptavidin-HRP | 6ml x1 |
解決を停止しなさい | 6ml x1 |
基質の解決A | 6ml x1 |
基質の解決B | 6ml x1 |
洗浄緩衝濃縮物(30x) | 20ml x1 |
Biotinylated牛のようなPRLの抗体 | 1ml x1 |
ユーザーの指示 | 1 |
版のシーラー | 2 pics |
ジッパー袋 | 1つのpic |
注意
標本コレクション
血清は血清が室温で10-20分の間凝固するようにする。20分の2000-3000のRPMの遠心分離機。
血しょうは抗凝固薬としてエチレンジアミン四酢酸かヘパリンを使用して血しょうを集める。2時の2000-3000のRPMの15分の遠心分離機のサンプル-コレクションの30分以内の8°C。
尿は生殖不能の管によって集まる。およそ20分の2000-3000のRPMの遠心分離機。pleuroperitoneal液体および脳脊髄液を集めた場合、前述のプロシージャに続きなさい。
細胞培養の上澄みは生殖不能の管によって部品を分泌するために検査するとき集まる。およそ20分の2000-3000のRPMの遠心分離機。supernatantsを注意深く集めなさい。細胞内の部品を検査した場合、およそ1 million/mlの細胞の集中に細胞の懸濁液を薄くする使用PBS (pH 7.2-7.4)。中の部品を放つ繰り返されたfreeze-thaw周期を通した損傷の細胞。およそ20分の2000-3000のRPMの遠心分離機。
ティッシュは他の体液余分な血を完全に取除き、均質化の前に重量を量るためにPBS (pH 7.4)のティッシュを洗う。ティッシュを細かく切り刻に、氷のガラス ホモジェナイザーとのPBS (pH7.4)の均質にしなさい。2-8°Cの雪解けかおよそ20分の2000-3000のRPMの-20°C.の遠心分離機の氷結。
ノート
*Sampleはこのキットと薄くすることができない。キットを準備するのに材料のために私達は使用するサンプル マトリックス干渉は不当に試金の特定性そして正確さを弱めるかもしれない。
概要
1. すべての試薬、サンプルおよび標準を準備しなさい。
2. 各井戸にサンプルおよびELISAの試薬を加えなさい。37°C.で1時間孵化させなさい。
3. 版を5回洗浄しなさい。
4. 37°C.で10分の基質の解決AおよびB. Incubateを加えなさい。
5. 停止する解決を加えれば色は成長する。
6. 10分以内のODの価値を読みなさい。
結果の計算
横の(x)軸線の集中に対して縦の(y)軸線の各標準のための平均ODの計画によって標準的なカーブをグラフのポイントを通した最もよく適当なカーブを引くために組み立てれば。これらの計算はコンピュータ ベースのカーブ付属品ソフトウェアと最もよく行い、最もよく適当なラインは回帰分析によって定めることができる。