血清のサンプルと利用できるISOの証明書のマウスELISAのキット96のWellsの習慣

96 Wellsの強い感受性および特定性のマウスのChemerin ELISAテスト キット
 

Cat.No E1662Mo

標準的なカーブの範囲:0.05ng/ml - 30ng/ml

感受性:0.023ng/ml

貯蔵:2-8°C.で試薬を貯えなさい。6ヶ月の貯蔵のために-20°C.でそれを保つために有効期限を参照しなさい。Avoid雪解け周期を繰り返した。個々の試薬が開けばキットが1か月以内に使用されることが推薦される。

*Thisプロダクトは研究の使用だけのために、ない診断のプロシージャの使用のためである。それは非常に使用の前にこの指示を完全に読むことを推薦するある。

精密

内部試金の精密（試金内の精密）は1つの版で知られていた集中の3つのサンプル内部試金の精密を査定するためにテストされた。

相互試金の精密（試金間の精密）は別の試金で知られていた集中の3つのサンプル相互試金の精密を査定するためにテストされた。

CV （%） = SD/mean X 100

内部試金:CV<8%

相互試金:CV<10%

試金の主義

このキットは酵素つながれたImmunosorbentの試金（ELISA）である。版はマウスのChemerinの抗体とプリコートされた。サンプルのChemerinの現在は加えられ、抗体への縛りは井戸で塗られる。そしてマウスのChemerinのbiotinylated抗体はサンプルのChemerinに縛り加えられ。それからStreptavidin-HRPは加えられ、Biotinylated Chemerinの抗体に結合する。孵化によって解かれるStreptavidin-HRPが洗浄のステップの間に洗い流された後。基質の解決はそれから加えられ、色はマウスChemerinの量に比例して成長する。反作用は酸性の付加で停止する解決を終わり、吸光度は450 nmで測定される。

提供される試薬

物質的な要求されるが、供給されない

• 37°C±0.5°C定温器
• 吸収性のペーパー
• 精密ピペットおよび使い捨て可能なピペットの先端
• きれいな管
• 脱イオンされるまたは蒸留水
• 450 ± 10nmの波長フィルターを持つMicroplateの読者

注意

• 使用前に、キットおよびサンプルは室温に30分自然に暖められるべきである。
• この指示は実験で厳しく続かれなければならない。
• ストリップの望ましい数が取除かれたら、すぐに悪化から残るために保護するように袋を封じ直しなさい。使用中場合のすべての試薬を覆いなさい。
• いつ試薬をピペットで移すこと十分によからの付加の順序そして率をピペットで移すMake sure。
• 手元のピペットの先端そして版のシーラーはクロス汚染を避けるためにきれい、使い捨て可能なべきである。
• 異なったバッチからの試薬を一緒に使用することを避けなさい。
• 基質の解決Bは長い間つくためにライトに敏感、露出しない基質の解決Bをである。
• 解決を含んでいる酸を停止しなさい。この材料を使用した場合目、手および皮保護を身に着けなさい。キットの試薬が付いている皮または粘膜の接触を避けなさい。
• キットは有効期限を越えて使用されるべきではない。

試薬の準備

すべての試薬は使用の前の室温に持って来られるべきである。

標準は16ng/ml標準貯蔵液を発生させるために標準的な希釈剤の120μlの標準（32ng/ml）の120μlを再構成する。標準が希薄を作る前に穏やかな撹拌の15分の間坐るようにしなさい。8ng/ml、4ng/ml、2ng/mlおよび1ng/ml解決を作り出すために連続的に標準的な希釈剤と標準貯蔵液（16ng/ml）の1:2を薄くすることによって重複した標準的なポイントを準備しなさい。ゼロの標準（0 ng/ml）として標準的な希釈剤のサーブ。どの残りの解決でも-20°Cで凍り、1か月以内に使用されるべきである。提案される標準ソリューションの希薄は次の通りある:

洗浄緩衝1x洗浄緩衝の500のmlをもたらすために脱イオンされるへの洗浄緩衝濃縮物30xの希薄な20mlまたは蒸留水。水晶が濃縮物で形作ったら、水晶が完全に分解したまで穏やかの組合せ。

試金プロシージャ

1. 指示されるようにすべての試薬、標準ソリューションおよびサンプルを準備しなさい。使用の前に室温にすべての試薬を持って来なさい。試金は室温で行われる。

2. 試金に必要なストリップの数を定めなさい。使用のためのフレームでストリップを挿入しなさい。未使用のストリップは2-8°C.で貯えられるべきである。

3. 標準に50μl標準をよく加えなさい。注:標準ソリューションがbiotinylated抗体を含んでいるので標準に抗体をよく加えてはいけない。

4. 40μlサンプルをサンプル井戸に井戸を見本抽出するためにそれから10μl反Chemerin抗体を加えるために加え、そしてサンプル井戸および標準的な井戸（よのない空白制御）に50μl streptavidin-HRPを加えなさい。よく混合しなさい。シーラーで版を覆いなさい。37°C.で60分を孵化させなさい。

5. シーラーを取除き、5回版を洗浄緩衝との洗浄しなさい。30秒から各ワシントン州の1分の少なくとも0.35 mlの洗浄緩衝に井戸を浸しなさい。自動化された洗浄のために、すべての井戸を吸い出し、洗浄緩衝が付いている井戸を入れ過ぎる洗浄緩衝との5回を洗浄しなさい。ペーパー タオルまたは他の吸収性材料に版にしみを付けなさい。

6. 50μl基質の解決Aを各井戸に加え、次に各井戸に50μl基質の解決Bを加えなさい。暗闇の37°Cで10分の新しいシーラーで覆われる版を孵化させなさい。

7. 50μlを停止する各井戸に解決を、青い色すぐに変わる黄色に加えなさい。

8. 停止解決を加えた後10のメヌエットの内の450 nmにmicroplateの読者セットを使用してすぐによくそれぞれの光学濃度（ODの価値）を定めなさい。

結果の計算

横の（x）軸線の集中に対して縦の（y）軸線の各標準のための平均ODの計画によって標準的なカーブをグラフのポイントを通した最もよく適当なカーブを引くために組み立てれば。これらの計算はコンピュータ ベースのカーブ付属品ソフトウェアと最もよく行い、最もよく適当なラインは回帰分析によって定めることができる。