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マウスの高密度脂蛋白質ELISAのキットHDLサンドイッチElisaの高く敏感なキット
Cat.No E0331Mo
標準的なカーブの範囲:0.5ng/ml - 200ng/ml
感受性:0.26ng/ml
サイズ:96の井戸
精密
内部試金の精密(試金内の精密)は1つの版で知られていた集中の3つのサンプル内部試金の精密を査定するためにテストされた。
相互試金の精密(試金間の精密)は別の試金で知られていた集中の3つのサンプル相互試金の精密を査定するためにテストされた。
CV (%) = SD/mean X 100
内部試金:CV<8%
相互試金:CV<10%
提供される試薬
部品 | 量 |
標準ソリューション(240ng/ml) | 0.5ml x1 |
プリコートされたELISAの版 | 12 * 8つの健康なストリップx1 |
標準的な希釈剤 | 3ml x1 |
Streptavidin-HRP | 6ml x1 |
解決を停止しなさい | 6ml x1 |
基質の解決A | 6ml x1 |
基質の解決B | 6ml x1 |
洗浄緩衝濃縮物(30x) | 20ml x1 |
BiotinylatedのマウスHDLの抗体 | 1ml x1 |
ユーザーの指示 | 1 |
版のシーラー | 2 pics |
ジッパー袋 | 1つのpic |
物質的な要求されるが、供給されない
標本コレクション
血清は血清が室温で10-20分の間凝固するようにする。20分の2000-3000のRPMの遠心分離機。
血しょうは抗凝固薬としてエチレンジアミン四酢酸かヘパリンを使用して血しょうを集める。2時の2000-3000のRPMの15分の遠心分離機のサンプル-コレクションの30分以内の8°C。
尿は生殖不能の管によって集まる。およそ20分の2000-3000のRPMの遠心分離機。pleuroperitoneal液体および脳脊髄液を集めた場合、前述のプロシージャに続きなさい。
細胞培養の上澄みは生殖不能の管によって部品を分泌するために検査するとき集まる。およそ20分の2000-3000のRPMの遠心分離機。supernatantsを注意深く集めなさい。細胞内の部品を検査した場合、およそ1 million/mlの細胞の集中に細胞の懸濁液を薄くする使用PBS (pH 7.2-7.4)。中の部品を放つ繰り返されたfreeze-thaw周期を通した損傷の細胞。およそ20分の2000-3000のRPMの遠心分離機。
余分な血を完全に取除き、均質化の前に重量を量るべきPBS (pH 7.4)のティッシュの洗浄のティッシュ。ティッシュを細かく切り刻に、氷のガラス ホモジェナイザーとのPBS (pH7.4)の均質にしなさい。2-8°Cの雪解けかおよそ20分の2000-3000のRPMの-20°C.の遠心分離機の氷結。
*Sampleはこのキットと薄くすることができない。キットを準備するのに材料のために私達は使用するサンプル マトリックス干渉は不当に試金の特定性そして正確さを弱めるかもしれない。
試薬の準備
すべての試薬は使用の前の室温に持って来られるべきである。
標準は120ng/ml標準貯蔵液を発生させるために標準的な希釈剤の120μlの標準(240ng/ml)の120μlを再構成する。標準が希薄を作る前に穏やかな撹拌の15分の間坐るようにしなさい。60ng/ml、30ng/ml、15ng/mlおよび7.5ng/ml解決を作り出すために連続的に標準的な希釈剤と標準貯蔵液(120ng/ml)の1:2を薄くすることによって重複した標準的なポイントを準備しなさい。ゼロの標準(0 ng/ml)として標準的な希釈剤のサーブ。どの残りの解決でも-20°Cで凍り、1か月以内に使用されるべきである。提案される標準ソリューションの希薄は次の通りある:
120ng/ml | 標準的なNo.5 | 120μl元の標準+ 120μl標準的な希釈剤 |
60ng/ml | 標準的なNo.4 | 標準120μl No.5 + 120μl標準的な希釈剤 |
30ng/ml | 標準的なNo.3 | 標準120μl No.4 + 120μl標準的な希釈剤 |
15ng/ml | 標準的なNo.2 | 標準120μl No.3 + 120μl標準的な希釈剤 |
7.5ng/ml | 標準的なNo.1 | 標準120μl No.2 + 120μl標準的な希釈剤 |
標準的な集中 | 標準的なNo.5 | 標準的なNo.4 | 標準的なNo.3 | 標準的なNo.2 | 標準的なNo.1 |
240ng/ml | 120ng/ml | 60ng/ml | 30ng/ml | 15ng/ml | 7.5ng/ml |
洗浄緩衝1x洗浄緩衝の500のmlをもたらすために脱イオンされるへの洗浄緩衝濃縮物30xの希薄な20mlまたは蒸留水。水晶が濃縮物で形作ったら、水晶が完全に分解したまで穏やかの組合せ。
概要
1. すべての試薬、サンプルおよび標準を準備しなさい。
2. 各井戸にサンプルおよびELISAの試薬を加えなさい。37°C.で1時間孵化させなさい。
3. 版を5回洗浄しなさい。
4. 37°C.で10分の基質の解決AおよびB. Incubateを加えなさい。
5. 停止する解決を加えれば色は成長する。
6. 10分以内のODの価値を読みなさい。