時間2時間ののラットELISAのキットのMannmaカスタマイズされた結合蛋白質試金の

カスタマイズされたラットのMannma結合蛋白質のマンナンの結合のLectin MBP MBL ELISAのキット

Cat.No E0629のRA

標準的なカーブの範囲:0.5ng/ml - 100ng/ml

感受性:0.25ng/ml

サイズ:96の井戸

貯蔵:終わる6ヶ月の貯蔵のための2-8°C.で試薬を参照します有効期限を保ちます-20°C.のAvoidによって繰り返される雪解け周期でそれを貯えて下さい。個々の試薬が開けばキットが1か月以内に使用されることが推薦されます。

*Thisプロダクトは研究の使用だけのために、ない診断のプロシージャの使用のためです。それは非常に使用の前にこの指示を完全に読むことを推薦しますあります。

試金の主義

このキットは酵素つながれたImmunosorbentの試金（ELISA）です。版はラットMBP/MBLの抗体とプリコートされました。MBP/MBLはサンプルで加えられ、井戸で塗られる抗体に結合します示します。そしてbiotinylatedラットMBP/MBLの抗体は加えられ、サンプルのMBP/MBLに結合します。それからStreptavidin-HRPは加えられ、Biotinylated MBP/MBLの抗体に結合します。孵化の後で解かれたStreptavidin-HRPは洗浄のステップの間に洗い流されます。基質の解決はそれから加えられ、色はラットMBP/MBLの量に比例して成長します。反作用は酸性の付加で停止します解決を終わり、吸光度は450 nmで測定されます。

意図されていた使用

このサンドイッチ キットはラットのMannmaの結合蛋白質、血清、血しょう、細胞培養のsupernates、細胞のlysates、ティッシュのホモジュネートのマンナンの結合のLectin （別名MBP/MBL）の正確で量的な検出のためです。

注意

• 使用前に、キットおよびサンプルは室温に30分自然に暖められるべきです。
• この指示は実験で厳しく続かれなければなりません。
• ストリップの望ましい数が取除かれたら、すぐに悪化から残を保護するために袋を封じ直して下さい。使用中場合のすべての試薬を覆って下さい。
• 試薬をピペットで移した場合付加の順序そして率を十分によからのピペットで移すMake sure。
• ピペットはひっくり返、手元の版のシーラーはクロス汚染を避けるためにきれい、使い捨て可能なべきです。
• 異なったバッチからの試薬を一緒に使用することを避けて下さい。
• 基質の解決Bは長い間つくためにライトに敏感、露出しません基質の解決Bをです。
• 解決を含んでいます酸を停止して下さい。この材料を使用した場合目、手および皮保護を身に着けて下さい。キットの試薬が付いている皮または粘膜の接触を避けて下さい。
• キットは有効期限を越えて使用されるべきではないです。

提供される試薬

試薬の準備

すべての試薬は使用の前の室温に持って来られるべきです。

標準は64ng/ml標準貯蔵液を発生させるために標準的な希釈剤の120μlの標準（128ng/ml）の120μlを再構成します。標準が希薄を作る前に穏やかな撹拌の15分の間坐るようにして下さい。32ng/ml、16ng/ml、8ng/mlおよび4ng/ml解決を作り出すために連続的に標準的な希釈剤と標準貯蔵液（64ng/ml）の1:2を薄くすることによって重複した標準的なポイントを準備して下さい。標準的な希釈剤はゼロ標準（0 ng/ml）として役立ちます。どの残りの解決でも-20°Cで凍り、1か月以内に使用されるべきです。提案される標準ソリューションの希薄は次の通りあります:

洗浄緩衝1x洗浄緩衝の500のmlをもたらすために脱イオンされるへの洗浄緩衝濃縮物30xの希薄な20mlまたは蒸留水。水晶が濃縮物で形作ったら、水晶が完全に分解したまで穏やかの組合せ。

試金プロシージャ

1. 指示されるようにすべての試薬、標準ソリューションおよびサンプルを準備して下さい。使用の前に室温にすべての試薬を持って来て下さい。試金は室温で行われます。

2. 試金に必要なストリップの数を定めて下さい。使用のためのフレームでストリップを挿入して下さい。未使用のストリップは2-8°C.で貯えられるべきです。

3. 標準に50μl標準をよく加えて下さい。注:標準ソリューションがbiotinylated抗体を含んでいるので標準に抗体をよく加えないで下さい。

4. 次に40μlサンプルをサンプル井戸に加え、サンプル井戸に10μl反MBP/MBL抗体を加え、そしてサンプル井戸および標準的な井戸（ない空白制御井戸）に50μl streptavidin-HRPを加えて下さい。よく混合して下さい。シーラーで版を覆って下さい。37°C.で60分を孵化させて下さい。

5. シーラーを取除き、5回版を洗浄緩衝との洗浄して下さい。30秒から各ワシントン州の1分の少なくとも0.35 mlの洗浄緩衝に井戸を浸して下さい。自動化された洗浄のために、すべての井戸を吸い出し、入り過ぎる洗浄緩衝との5回を湧き出ます洗浄緩衝と洗浄して下さい。ペーパー タオルまたは他の吸収性材料に版にしみを付けて下さい。

6. 50μl基質の解決Aをそれぞれに井戸加え、次にそれぞれに50μl基質の解決Bをよく加えて下さい。暗闇の37°Cで10分の新しいシーラーで覆われる版を孵化させて下さい。

7. 50μlをよく停止しますそれぞれに解決を、青い色すぐに変わります黄色に加えて下さい。

8. 停止解決を加えた後10のメヌエットの内の450 nmにmicroplateの読者セットを使用してそれぞれの光学濃度（ODの価値）をすぐに井戸定めて下さい。

概要

1. すべての試薬、サンプルおよび標準を準備して下さい。

2. それぞれにサンプルおよびELISAの試薬をよく加えて下さい。37°C.で1時間孵化させて下さい。

3. 版を5回洗浄して下さい。

4. 37°C.で10分の基質の解決AおよびB. Incubateを加えて下さい。

5. 停止します解決を加えれば色は成長します。

6. 10分以内のODの価値を読んで下さい。

Referances

「希突起膠細胞の髄鞘の基本的な蛋白質の段階特定の表現Sp1トランスクリプション要因によって」。は取り除かれるNkx2.2仲介された抑圧を含みます
魏Q.、Miskimins W.K.、Miskimins R。
J. Biol. Chem。280:16284- 16294(2005)