人間のアルプスの高い特定性および感受性のためのELISAのキット

人間のアルプスの高い特定性および感受性のためのELISAのキット

Cat.No E0813Hu

標準的なカーブの範囲:2IU/L - 600IU/L

感受性:1.12IU/L

意図されていた使用

このサンドイッチ キットは血清、血しょう、細胞培養のsupernates、細胞のlysates、ティッシュのホモジュネートの人間のアルカリ ホスファターゼ（別名アルプス）の正確で量的な検出のためである。

試金の主義

このキットは酵素つながれたImmunosorbentの試金（ELISA）である。版は人間のアルプスの抗体とプリコートされた。サンプルのアルプスの現在は加えられ、抗体への縛りは井戸で塗られる。そしてbiotinylated人間のアルプスの抗体はサンプルのアルプスに縛り加えられ。それからStreptavidin-HRPは加えられ、Biotinylatedのアルプスの抗体に結合する。孵化によって解かれるStreptavidin-HRPが洗浄のステップの間に洗い流された後。基質の解決はそれから加えられ、色は人間のアルプスの量に比例して成長する。反作用は酸性の付加で停止する解決を終わり、吸光度は450 nmで測定される。

提供される試薬

物質的な要求されるが、供給されない

• 37°C±0.5°C定温器
• 吸収性のペーパー
• 精密ピペットおよび使い捨て可能なピペットの先端
• きれいな管
• 脱イオンされるまたは蒸留水
• 450 ± 10nmの波長フィルターを持つMicroplateの読者

注意

• 使用前に、キットおよびサンプルは室温に30分自然に暖められるべきである。
• この指示は実験で厳しく続かれなければならない。
• ストリップの望ましい数が取除かれたら、すぐに悪化から残るために保護するように袋を封じ直しなさい。使用中場合のすべての試薬を覆いなさい。
• いつ試薬をピペットで移すこと十分によからの付加の順序そして率をピペットで移すMake sure。
• 手元のピペットの先端そして版のシーラーはクロス汚染を避けるためにきれい、使い捨て可能なべきである。
• 異なったバッチからの試薬を一緒に使用することを避けなさい。
• 基質の解決Bは長い間つくためにライトに敏感、露出しない基質の解決Bをである。
• 解決を含んでいる酸を停止しなさい。この材料を使用した場合目、手および皮保護を身に着けなさい。キットの試薬が付いている皮または粘膜の接触を避けなさい。
• キットは有効期限を越えて使用されるべきではない。

試薬の準備

すべての試薬は使用の前の室温に持って来られるべきである。

標準は標準の120μlを再構成する（800IU/L） 400IU/L標準貯蔵液を発生させる標準的な希釈剤の120μlと。標準が希薄を作る前に穏やかな撹拌の15分の間坐るようにしなさい。連続的に標準貯蔵液を薄くすることによって重複した標準的なポイントを準備しなさい（400IU/L） 200IU/L、100IU/L、50IU/Lおよび25IU/L解決を作り出す標準的な希釈剤との1:2。ゼロの標準（0 IU/L）として標準的な希釈剤のサーブ。どの残りの解決でも-20°Cで凍り、1か月以内に使用されるべきである。提案される標準ソリューションの希薄は次の通りある:

洗浄緩衝1x洗浄緩衝の500のmlをもたらすために脱イオンされるへの洗浄緩衝濃縮物30xの希薄な20mlまたは蒸留水。水晶が濃縮物で形作ったら、水晶が完全に分解したまで穏やかの組合せ。

概要

1. すべての試薬、サンプルおよび標準を準備しなさい。

2. 各井戸にサンプルおよびELISAの試薬を加えなさい。37°C.で1時間孵化させなさい。

3. 版を5回洗浄しなさい。

4. 37°C.で10分の基質の解決AおよびB. Incubateを加えなさい。

5. 停止する解決を加えれば色は成長する。

6. 10分以内のODの価値を読みなさい。

結果の計算

横の（x）軸線の集中に対して縦の（y）軸線の各標準のための平均ODの計画によって標準的なカーブをグラフのポイントを通した最もよく適当なカーブを引くために組み立てれば。これらの計算はコンピュータ ベースのカーブ付属品ソフトウェアと最もよく行い、最もよく適当なラインは回帰分析によって定めることができる。