一酸化窒素サンドイッチElisaのキットの高い感受性/精密96 Wells

96 Wellsの高い感受性および精密マウスの一酸化窒素サンドイッチELISAキット

Cat.No E0439Mo

*Thisプロダクトは研究の使用だけのために、ない診断のプロシージャの使用のためである。それは非常に使用の前にこの指示を完全に読むことを推薦するある。

意図されていた使用

このサンドイッチ キットは血清、血しょう、細胞培養のsupernates、細胞のlysates、ティッシュのホモジュネートのマウスの一酸化窒素の正確で量的な検出のため（別名いいえ）である。

試金の主義

このキットは酵素つながれたImmunosorbentの試金（ELISA）である。版はマウスと抗体プリコートされなかった。サンプルの現在は加えられないし、抗体への縛りは井戸で塗られる。そしてbiotinylatedマウスは抗体加えられないし、にサンプルで結合する。それからStreptavidin-HRPは加えられ、Biotinylatedに抗体を結合しない。孵化によって解かれるStreptavidin-HRPが洗浄のステップの間に洗い流された後。基質の解決はそれから加えられ、色はマウスの量に比例していいえ成長する。反作用は酸性の付加で停止する解決を終わり、吸光度は450 nmで測定される。

提供される試薬

標本コレクション
血清は血清が室温で10-20分の間凝固するようにする。20分の2000-3000のRPMの遠心分離機。
 
血しょうは抗凝固薬としてエチレンジアミン四酢酸かヘパリンを使用して血しょうを集める。2時の2000-3000のRPMの15分の遠心分離機のサンプル-コレクションの30分以内の8°C。
 
尿は生殖不能の管によって集まる。およそ20分の2000-3000のRPMの遠心分離機。pleuroperitoneal液体および脳脊髄液を集めた場合、前述のプロシージャに続きなさい。
 
細胞培養の上澄みは生殖不能の管によって部品を分泌するために検査するとき集まる。およそ20分の2000-3000のRPMの遠心分離機。supernatantsを注意深く集めなさい。細胞内の部品を検査した場合、およそ1 million/mlの細胞の集中に細胞の懸濁液を薄くする使用PBS （pH 7.2-7.4）。中の部品を放つ繰り返されたfreeze-thaw周期を通した損傷の細胞。およそ20分の2000-3000のRPMの遠心分離機。
 
余分な血を完全に取除き、均質化の前に重量を量るべきPBS （pH 7.4）のティッシュの洗浄のティッシュ。ティッシュを細かく切り刻に、氷のガラス ホモジェナイザーとのPBS （pH7.4）の均質にしなさい。2-8°Cの雪解けかおよそ20分の2000-3000のRPMの-20°C.の遠心分離機の氷結。

ノート

• サンプル集中は試金で使用される前に予測されるべきである。サンプル集中が標準的なカーブの範囲の内になければ、ユーザーは彼らの特定の実験のための最適のサンプルを定めるために私達に連絡しなければならない。
• 5日以内に使用されるべきサンプルは2-8°C.サンプルでaliquotedべきまたは1か月以内の-20°Cか6か月以内の-80°Cで貯えられなければならない貯えられるべきである。Avoid氷結の雪解け周期を繰り返した。
• サンプルは試金を始める前の室温に持って来られるべきである。
• 使用の前にサンプルを集めるために遠心分離機にかけなさい。
• NaN3を含んでいるサンプルはホース ラディッシュの過酸化酵素（HRP）の活動を禁じると同時にテストすることができない。
• supernatantsを注意深く集めなさい。沈殿物が貯蔵の間に起こったときに、遠心分離は再度行われるべきである。
• 溶血は試験結果の妥当性に非常に影響を与えることができる。溶血を最小にするために心配を取りなさい。

*Sampleはこのキットと薄くすることができない。キットを準備するのに材料のために私達は使用するサンプル マトリックス干渉は不当に試金の特定性そして正確さを弱めるかもしれない。

試薬の準備

すべての試薬は使用の前の室温に持って来られるべきである。標準は標準の120μlを再構成する（480μmol/L） 240μmol/L標準貯蔵液を発生させる標準的な希釈剤の120μlと。標準が希薄を作る前に穏やかな撹拌の15分の間坐るようにしなさい。連続的に標準貯蔵液を薄くすることによって重複した標準的なポイントを準備しなさい（240μmol/L） 120μmol/L、60μmol/L、30μmol/Lおよび15μmol/L解決を作り出す標準的な希釈剤との1:2。ゼロの標準（0 μmol/L）として標準的な希釈剤のサーブ。どの残りの解決でも-20℃で凍り、1か月以内に使用されるべきである。提案される標準ソリューションの希薄は次の通りある:

洗浄緩衝1x洗浄緩衝の500のmlをもたらすために脱イオンされるへの洗浄緩衝濃縮物30xの希薄な20mlまたは蒸留水。水晶が濃縮物で形作ったら、水晶が完全に分解したまで穏やかの組合せ。