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96井戸の特定性牛のようなGH ELISAのキット
Cat.No E0013Bo
標準的なカーブの範囲:0.05ng/ml - 10ng/ml
感受性:0.026ng/ml
サイズ:96の井戸
貯蔵:終わる6ヶ月の貯蔵のための2-8°C.で試薬を参照します有効期限を保ちます-20°C.のAvoidによって繰り返される雪解け周期でそれを貯えて下さい。個々の試薬が開けばキットが1か月以内に使用されることが推薦されます。
*このプロダクトは研究の使用だけのために、ない診断のプロシージャの使用のためです。それは非常に使用の前にこの指示を完全に読むことを推薦しますあります。
提供される試薬
部品 | 量 |
標準ソリューション(12.8ng/ml) | 0.5ml x1 |
プリコートされたELISAの版 | 12 * 8つの健康なストリップx1 |
標準的な希釈剤 | 3ml x1 |
Streptavidin-HRP | 6ml x1 |
解決を停止して下さい | 6ml x1 |
基質の解決A | 6ml x1 |
基質の解決B | 6ml x1 |
洗浄緩衝濃縮物(30x) | 20ml x1 |
Biotinylated牛のようなGHの抗体 | 1ml x1 |
ユーザーの指示 | 1 |
版のシーラー | 2 pics |
ジッパー袋 | 1つのpic |
試薬の準備
すべての試薬は使用の前の室温に持って来られるべきです。
標準は6.4ng/ml標準貯蔵液を発生させるために標準的な希釈剤の120μlの標準(12.8ng/ml)の120μlを再構成します。標準が希薄を作る前に穏やかな撹拌の15分の間坐るようにして下さい。3.2ng/ml、1.6ng/ml、0.8ng/mlおよび0.4ng/ml解決を作り出すために連続的に標準的な希釈剤と標準貯蔵液(6.4ng/ml)の1:2を薄くすることによって重複した標準的なポイントを準備して下さい。標準的な希釈剤はゼロ標準(0 ng/ml)として役立ちます。どの残りの解決でも-20℃で凍り、1か月以内に使用されるべきです。提案される標準ソリューションの希薄は次の通りあります:
6.4ng/ml | 標準的なNo.5 | 120μl元の標準+ 120μl標準の希釈剤 |
3.2ng/ml | 標準的なNo.4 | 標準120μl No.5 + 120μl標準の希釈剤 |
1.6ng/ml | 標準的なNo.3 | 標準120μl No.4 + 120μl標準の希釈剤 |
0.8ng/ml | 標準的なNo.2 | 標準120μl No.3 + 120μl標準の希釈剤 |
0.4ng/ml | 標準的なNo.1 | 標準120μl No.2 + 120μl標準の希釈剤 |
標準的な集中 | 標準的なNo.5 | 標準的なNo.4 | 標準的なNo.3 | 標準的なNo.2 | 標準的なNo.1 |
12.8ng/ml | 6.4ng/ml | 3.2ng/ml | 1.6ng/ml | 0.8ng/ml | 0.4ng/ml |
洗浄緩衝1x洗浄緩衝の500のmlをもたらすために脱イオンされるへの洗浄緩衝濃縮物30xの希薄な20mlまたは蒸留水。水晶が濃縮物で形作ったら、水晶が完全に分解したまで穏やかの組合せ。
試金プロシージャ
1. 指示されるようにすべての試薬、標準ソリューションおよびサンプルを準備して下さい。使用の前に室温にすべての試薬を持って来て下さい。試金は室温で行われます。
2. 試金に必要なストリップの数を定めて下さい。使用のためのフレームでストリップを挿入して下さい。未使用のストリップは2-8°C.で貯えられるべきです。
3. 標準に50μl標準をよく加えて下さい。注:標準ソリューションがbiotinylated抗体を含んでいるので標準に抗体をよく加えないで下さい。
4. 次に40μlサンプルをサンプル井戸に加え、サンプル井戸に10μl反GHの抗体を加え、そしてサンプル井戸および標準的な井戸(ない空白制御井戸)に50μl streptavidin-HRPを加えて下さい。よく混合して下さい。シーラーで版を覆って下さい。37°C.で60分を孵化させて下さい。
5. シーラーを取除き、5回版を洗浄緩衝との洗浄して下さい。30秒から各ワシントン州の1分の少なくとも0.35 mlの洗浄緩衝に井戸を浸して下さい。自動化された洗浄のために、すべての井戸を吸い出し、入り過ぎる洗浄緩衝との5回を湧き出ます洗浄緩衝と洗浄して下さい。ペーパー タオルまたは他の吸収性材料に版にしみを付けて下さい。
6. 50μl基質の解決Aをそれぞれに井戸加え、次にそれぞれに50μl基質の解決Bをよく加えて下さい。暗闇の37°Cで10分の新しいシーラーで覆われる版を孵化させて下さい。
7. 50μlをよく停止しますそれぞれに解決を、青い色すぐに変わります黄色に加えて下さい。
8. 停止解決を加えた後10のメヌエットの内の450 nmにmicroplateの読者セットを使用してそれぞれの光学濃度(ODの価値)をすぐに井戸定めて下さい。
参照
[1] 「パキスタン牛の成長ホルモンの遺伝子のクローニングそして配列は繁殖します(ウシのトーラス)。「Mahmood S.F.、Awan I.N.、Khan M.J.、Shahzad M.I.、Khanum A.Submitted (FEB-2007)
[2つ] 「エシェリヒア属大腸菌の牛のような成長ホルモンの遺伝子のcDNAをクローンとして作ります。「Javadmanesh A.、Nassiry M.、Eftekhari Shahrudi F.、Basami M.Submitted (AUG-2005)