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7 年
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牛のようなFetuin高いSpesificityおよび感受性のELISAのキット
Cat.No E2018Bo
標準的なカーブの範囲:5mg/L - 1800mg/L
感受性:2.54mg/L
サイズ:96の井戸
貯蔵:終わる6ヶ月の貯蔵のための2-8°C.で試薬を参照します有効期限を保ちます-20°C.のAvoidによって繰り返される雪解け周期でそれを貯えて下さい。個々の試薬が開けばキットが1か月以内に使用されることが推薦されます。
*このプロダクトは研究の使用だけのために、ない診断のプロシージャの使用のためです。それは非常に使用の前にこの指示を完全に読むことを推薦しますあります。
意図されていた使用
このサンドイッチ キットは血清、血しょう、細胞培養のsupernates、細胞のlysates、ティッシュのホモジュネートの牛のようなFetuin A （別名FETU-A）の正確で量的な検出のためです。
試金の主義
このキットは酵素つながれたImmunosorbentの試金（ELISA）です。版は牛のようなFETU-Aの抗体とプリコートされました。FETU-Aはサンプルで加えられ、井戸で塗られる抗体に結合します示します。そしてbiotinylated牛のようなFETU-Aの抗体は加えられ、サンプルのFETU-Aに結合します。それからStreptavidin-HRPは加えられ、Biotinylated FETU-Aの抗体に結合します。孵化の後で解かれたStreptavidin-HRPは洗浄のステップの間に洗い流されます。基質の解決はそれから加えられ、色は牛のようなFETU-Aの量に比例して成長します。反作用は酸性の付加で停止します解決を終わり、吸光度は450 nmで測定されます。
| 960mg/L | 標準的なNo.5 | 120μl元の標準+ 120μl標準の希釈剤 |
| 480mg/L | 標準的なNo.4 | 標準120μl No.5 + 120μl標準の希釈剤 |
| 240mg/L | 標準的なNo.3 | 標準120μl No.4 + 120μl標準の希釈剤 |
| 120mg/L | 標準的なNo.2 | 標準120μl No.3 + 120μl標準の希釈剤 |
| 60mg/L | 標準的なNo.1 | 標準120μl No.2 + 120μl標準の希釈剤 |
| 標準的な集中 | 標準的なNo.5 | 標準的なNo.4 | 標準的なNo.3 | 標準的なNo.2 | 標準的なNo.1 |
| 1920mg/L | 960mg/L | 480mg/L | 240mg/L | 120mg/L | 60mg/L |
洗浄緩衝1x洗浄緩衝の500のmlをもたらすために脱イオンされるへの洗浄緩衝濃縮物30xの希薄な20mlまたは蒸留水。水晶が濃縮物で形作ったら、水晶が完全に分解したまで穏やかの組合せ。
試金プロシージャ
1. 指示されるようにすべての試薬、標準ソリューションおよびサンプルを準備して下さい。使用の前に室温にすべての試薬を持って来て下さい。試金は室温で行われます。
2. 試金に必要なストリップの数を定めて下さい。使用のためのフレームでストリップを挿入して下さい。未使用のストリップは2-8°C.で貯えられるべきです。
3. 標準に50μl標準をよく加えて下さい。注:標準ソリューションがbiotinylated抗体を含んでいるので標準に抗体をよく加えないで下さい。
4. 次に40μlサンプルをサンプル井戸に加え、サンプル井戸に10μl反FETU抗体を加え、そしてサンプル井戸および標準的な井戸（ない空白制御井戸）に50μl streptavidin-HRPを加えて下さい。よく混合して下さい。シーラーで版を覆って下さい。37°C.で60分を孵化させて下さい。
5. シーラーを取除き、5回版を洗浄緩衝との洗浄して下さい。30秒から各ワシントン州の1分の少なくとも0.35 mlの洗浄緩衝に井戸を浸して下さい。自動化された洗浄のために、すべての井戸を吸い出し、入り過ぎる洗浄緩衝との5回を湧き出ます洗浄緩衝と洗浄して下さい。ペーパー タオルまたは他の吸収性材料に版にしみを付けて下さい。
6. 50μl基質の解決Aをそれぞれに井戸加え、次にそれぞれに50μl基質の解決Bをよく加えて下さい。暗闇の37°Cで10分の新しいシーラーで覆われる版を孵化させて下さい。
7. 50μlをよく停止しますそれぞれに解決を、青い色すぐに変わります黄色に加えて下さい。
8. 停止解決を加えた後10のメヌエットの内の450 nmにmicroplateの読者セットを使用してそれぞれの光学濃度（ODの価値）をすぐに井戸定めて下さい。
参照
[1] 「MALDI-TOF MSを使用してNつながれた糖蛋白質の場所特定にglycoprofiling:強い相関関係のbetweensignalの強さおよびglycoformの量。「Thaysen-Andersen M.、Mysling S.、Hojrup P.Anal。Chem。81:3933- 3943(2009)