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腸炎ビブリオのキットの核酸PCRの検出のキット
(PCR蛍光調査方法)
意図されていた使用:
このキットは餌、試水、エビの実生植物、エビのティッシュおよび処理されたプロダクトの病原性のある腸炎ビブリオ(Vpa)の特定の検出のために適している。
主義:
このキットはプライマー拡大の地域の真中でDNAの型板のセクションにとりわけ結合できるプライマー調査の調査を設計するのに腸炎ビブリオ(Vpa)の特定の片を使用する。PCR延長プロセスの間に、Taqの酵素のexonuclideの活動は5つを-調査からfluorophoreターミナル切り、反作用システムで自由にさせる。従って、3"
-端によって癒やされたグループは分かれて、完全に閉鎖した反作用システムの腸炎ビブリオの核酸(Vpa)の検出を達成するために蛍光性PCRの器械によって検出された蛍光性は出た。
主要なコンポーネント:
部品 | 指定 |
PCRの反作用の液体 | 24の管 |
肯定的な制御 | 1つの管 |
否定的な制御 | 1つの管 |
サンプル条件:
1. サンプル タイプ
エビの実生植物、エビのティッシュ、水ボディ、餌、処理されたプロダクト、等
2. コレクションおよび交通機関を見本抽出しなさい
コレクションを見本抽出すれば交通機関はNY/T 541に従って遂行される。サンプルは冷やされていた条件の下で実験室に繰り返されたfreeze-thaw避けるためにできるだけ早く運ばれる。
3. サンプル保存
それは2℃~8℃の24時間貯え-20℃で長い間貯えることができる。
Micgene 242/244/244IVDおよびABI QuantStudio5を使用して:
プロシージャは次として置かれる:
ステップ | 周期数 | 温度 | 時間 |
1 | 1 | 95℃ | 3min |
2 | 45 | 95℃ | 10s |
60℃ | 30sCollect蛍光 |
FAMは検出チャネルに選ばれた。
解釈の結果
結果 | Ctの価値 |
陽性 | Ct≤40 |
陰性 | Ctの価値かCt無しvalue≥45 |
曖昧な点 | 40<Ct<45> |
注:結果は再確認される必要がある曖昧な点であると判断される。再確認しなさい結果はCtの価値である < 45="" is="" considered="" as="" positive="">
結果の分析:
器械使用を使用して自動分析
品質管理:
否定的な制御:FAMの検出チャネルの明らかな拡大のカーブ無し;
肯定的な制御:FAMチャネルは明らかな拡大のカーブ、Ctの価値≤30を示した;
上記の条件は同じ実験で同時に満たされる;別の方法で、実験は無効であり、再試験は要求される。