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人間のインシュリンそっくりの成長因子1;IGF-1;Mechanoの成長因子;MGF ELISAのキット
主義
このELISAのキットは方法としてサンドイッチELISAを使用する。このキットで提供されるMicroelisaのstripplateはIGF-1に特定の抗体とプリコートされた。標準かサンプルは適切なMicroelisaのstripplateの井戸に加えられ、特定の抗体に結合した。それから西洋わさびの過酸化酵素(HRP) - IGF-1のためにMicroelisaの各stripplateに特定の活用された抗体はよく加えられ、孵化する。自由な部品は洗い流される。TMBの基質の解決は各井戸に加えられる。IGF-1およびHRPによって活用されるIGF-1抗体を含んでいるそれらの井戸だけ色で青いようで、次に停止解決の付加の後で黄色い回る。光学濃度(OD)は450 nmの波長でspectrophotometrically測定される。ODの価値はIGF-1の集中に比例している。標準的なカーブとサンプルのODを比較することによってサンプルのIGF-1の集中を計算できる。
キットを与えられる材料
キットを与えられる材料 | 48決定 | 96決定 | 貯蔵 | |
1 | 利用者マニュアル | 1 | 1 | R.T. |
2 | かど金の膜 | 2 | 2 | R.T. |
3 | 密封された袋 | 1 | 1 | R.T. |
4 | Microelisaのstripplate | 1 | 1 | 2-8℃ |
5 | 標準:90ng/ml | 0.5ml×1びん | 0.5ml×1びん | 2-8℃ |
6 | 標準的な希釈剤 | 1.5ml×1びん | 1.5ml×1びん | 2-8℃ |
7 | HRP共役試薬 | 3ml×1びん | 6ml×1びん | 2-8℃ |
8 | サンプル希釈剤 | 3ml×1びん | 6ml×1びん | 2-8℃ |
9 | 色原体の解決A | 3ml×1びん | 6ml×1びん | 2-8℃ |
10 | 色原体の解決B | 3ml×1びん | 6ml×1びん | 2-8℃ |
11 | 解決を停止しなさい | 3ml×1びん | 6ml×1びん | 2-8℃ |
12 | 洗浄解決 | 20ml (20X) ×1bottle | 20ml (30X) ×1bottle | 2-8℃ |
結果の計算
人間IGF-1標準および対応する読書ODの知られていた集中は丸太のスケール(x軸)および丸太のスケール(y軸)でそれぞれ計画される。サンプルの人間IGF-1の集中は計画によってY軸のサンプルのO.D.定められる。元の集中は希薄の要因の増加によって計算される。
精密
内部試金の精密(試金内の精密):低く、中間高レベル人間IGF-1の3つのサンプルは20回1つの版の、それぞれテストされた。
相互試金の精密(試金間の精密):3つの版、各版の8つの反復実験でテストされる低く、中間高レベル人間IGF-1wereの3つのサンプル。
CV (%) = SD/meanX100
内部試金:CV<10>
相互試金:CV<12>
試金の範囲
1.6 ng/ml -70 ng/ml
感受性:
0.5 ng/ml