成長因子I SomatomedinのようなヒツジIgf1 Elisaのキットのインシュリン

ヒツジのインシュリンそっくりの成長の要因私、SomatomedinのIGF-I ELISAのキット

主義

このELISAのキットは方法としてサンドイッチELISAを使用する。このキットで提供されるMicroelisaのstripplateはIGF-1に特定の抗体とプリコートされた。標準かサンプルは適切なMicroelisaのstripplateの井戸に加えられ、特定の抗体に結合した。それから西洋わさびの過酸化酵素（HRP） - IGF-1のためにMicroelisaの各stripplateに特定の活用された抗体はよく加えられ、孵化する。自由な部品は洗い流される。TMBの基質の解決は各井戸に加えられる。IGF-1およびHRPによって活用されるIGF-1抗体を含んでいるそれらの井戸だけ色で青いようで、次に停止解決の付加の後で黄色い回る。光学濃度（OD）は450 nmの波長でspectrophotometrically測定される。ODの価値はIGF-1の集中に比例している。標準的なカーブとサンプルのODを比較することによってサンプルのIGF-1の集中を計算できる。

キットを与えられる材料

精密

内部試金の精密（試金内の精密）:低く、中間高レベルIGF-1の3つのサンプルは20回1つの版の、それぞれテストされた。

相互試金の精密（試金間の精密）:低く、中間高レベルIGF-1の3つのサンプルは3つの版、各版の8つの反復実験でテストされた。

CV （%） = SD/meanX100

内部試金:CV<10>

相互試金:CV<12>

試金の範囲

0.3ng/ml -20 ng/ml

感受性:

0.05ng/ml

注:

• レシートに4°Cでキットを貯えなさい。キットは試金の前の室温に平衡させるべきである。要らないストリップを牛のようなIGF-1抗体上塗を施してある版から取除き、ジップ ロック式ホイルの封じ直し、そして4°C.で保ちなさい。
• 沈殿物は集中された洗浄の緩衝で現われるかもしれない。結果に影響を与えないすべての沈殿物を分解するために緩衝を熱しなさい。
• 正確なピペットが実験間違いを避けるのに使用されるべきである。サンプルは5分以下のMicroplateに加えられるべきである。多数のサンプルが含まれていれば、マルチ チャネルのピペットは推薦される。
• 標準的なカーブはあらゆる試金に含まれているべきである。反復同音の井戸は推薦される。サンプルのODの価値が標準の最初の井戸より大きかったら、テストの前にサンプル（nの時間）を薄くしなさい。origina IGF-1の集中を計算した場合、総希薄の要因（XnX5）を増加しなさい。
• クロス汚染を避けるため、Microplateのシーラーは一度だけの使用だけのためである。
• ライトからの基質を保ちなさい。
• すべての操作は製造業者の指示を含む厳しく調和べきである。マイクロ プレートの読者によって定められる結果。
• すべてのサンプル、洗浄の緩衝および無駄は病原菌として扱われるべきである。
• 異なったロットからの試薬は混合されるべきではない。

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