牛のようなSDHサンドイッチELISAキットの強い感受性のソルビトールのデヒドロゲナーゼELISAテスト キット

Brand Name:BT Lab
Certification:CE, ISO9001:2015, MSDS
Model Number:Cat.No E0079Bo
Minimum Order Quantity:Negotiation
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Place of Origin:Shanghai, China
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製品詳細

牛のようなSDHサンドイッチELISAキットの強い感受性のソルビトールのデヒドロゲナーゼELISAテスト キット
 

Cat.No E0079Bo

*Thisプロダクトは研究の使用だけのために、ない診断のプロシージャの使用のためである。それは非常に使用の前にこの指示を完全に読むことを推薦するある。

 

意図されていた使用

このサンドイッチ キットは血清、血しょう、細胞培養のsupernates、細胞のlysates、ティッシュのホモジュネートの牛のようなソルビトールのデヒドロゲナーゼ(別名SDH)の正確で量的な検出のためである。

 

試金の主義

これはELISAのキットをである酵素つながれたImmunosorbentの試金(ELISA)挟む。版は牛のようなSDHの抗体とプリコートされた。サンプルのSDHの現在は加えられ、抗体への縛りは井戸で塗られる。そしてbiotinylated牛のようなSDHの抗体はサンプルのSDHに縛り加えられ。それからStreptavidin-HRPは加えられ、Biotinylated SDHの抗体に結合する。孵化によって解かれるStreptavidin-HRPが洗浄のステップの間に洗い流された後。基質の解決はそれから加えられ、色は牛のようなSDHの量に比例して成長する。反作用は酸性の付加で停止する解決を終わり、吸光度は450 nmで測定される。

 

提供される試薬

部品
標準ソリューション(128mIU/ml)0.5ml x1
プリコートされたELISAの版12 * 8つの健康なストリップx1
標準的な希釈剤3ml x1
Streptavidin-HRP6ml x1
解決を停止しなさい6ml x1
基質の解決A6ml x1
基質の解決B6ml x1
洗浄緩衝濃縮物(30x)20ml x1
Biotinylated牛のようなSDHの抗体1ml x1
ユーザーの指示1
版のシーラー2 pics
ジッパー袋1つのpic

 

標本コレクション

血清は血清が室温で10-20分の間凝固するようにする。20分の2000-3000のRPMの遠心分離機。

 

血しょうは抗凝固薬としてエチレンジアミン四酢酸かヘパリンを使用して血しょうを集める。2時の2000-3000のRPMの15分の遠心分離機のサンプル-コレクションの30分以内の8°C。

 

尿は生殖不能の管によって集まる。およそ20分の2000-3000のRPMの遠心分離機。pleuroperitoneal液体および脳脊髄液を集めた場合、前述のプロシージャに続きなさい。

 

細胞培養の上澄みは生殖不能の管によって部品を分泌するために検査するとき集まる。およそ20分の2000-3000のRPMの遠心分離機。supernatantsを注意深く集めなさい。細胞内の部品を検査した場合、およそ1 million/mlの細胞の集中に細胞の懸濁液を薄くする使用PBS (pH 7.2-7.4)。中の部品を放つ繰り返されたfreeze-thaw周期を通した損傷の細胞。およそ20分の2000-3000のRPMの遠心分離機。

 

余分な血を完全に取除き、均質化の前に重量を量るべきPBS (pH 7.4)のティッシュの洗浄のティッシュ。ティッシュを細かく切り刻に、氷のガラス ホモジェナイザーとのPBS (pH7.4)の均質にしなさい。2-8°Cの雪解けかおよそ20分の2000-3000のRPMの-20°C.の遠心分離機の氷結。

 

ノート

  • サンプル集中は試金で使用される前に予測されるべきである。サンプル集中が標準的なカーブの範囲の内になければ、ユーザーは彼らの特定の実験のための最適のサンプルを定めるために私達に連絡しなければならない。
  • 5日以内に使用されるべきサンプルは2-8°C.サンプルでaliquotedべきまたは1か月以内の-20°Cか6か月以内の-80°Cで貯えられなければならない貯えられるべきである。Avoid氷結の雪解け周期を繰り返した。
  • サンプルは試金を始める前の室温に持って来られるべきである。
  • 使用の前にサンプルを集めるために遠心分離機にかけなさい。
  • NaN3を含んでいるサンプルはホース ラディッシュの過酸化酵素(HRP)の活動を禁じると同時にテストすることができない。
  • supernatantsを注意深く集めなさい。沈殿物が貯蔵の間に起こったときに、遠心分離は再度行われるべきである。
  • 溶血は試験結果の妥当性に非常に影響を与えることができる。溶血を最小にするために心配を取りなさい。

*Sampleはこのキットと薄くすることができない。キットを準備するのに材料のために私達は使用するサンプル マトリックス干渉は不当に試金の特定性そして正確さを弱めるかもしれない。

 

試薬の準備

すべての試薬は使用の前の室温に持って来られるべきである。

標準は64mIU/ml標準貯蔵液を発生させるために標準的な希釈剤の120μlの標準(128mIU/ml)の120μlを再構成する。標準が希薄を作る前に穏やかな撹拌の15分の間坐るようにしなさい。32mIU/ml、16mIU/ml、8mIU/mlおよび4mIU/ml解決を作り出すために連続的に標準的な希釈剤と標準貯蔵液(64mIU/ml)の1:2を薄くすることによって重複した標準的なポイントを準備しなさい。ゼロの標準(0 mIU/ml)として標準的な希釈剤のサーブ。どの残りの解決でも-20°Cで凍り、1か月以内に使用されるべきである。提案される標準ソリューションの希薄は次の通りある:

 

64mIU/ml標準的なNo.5120μl元の標準+ 120μl標準的な希釈剤
32mIU/ml標準的なNo.4標準120μl No.5 + 120μl標準的な希釈剤
16mIU/ml標準的なNo.3標準120μl No.4 + 120μl標準的な希釈剤
8mIU/ml標準的なNo.2標準120μl No.3 + 120μl標準的な希釈剤
4mIU/ml標準的なNo.1標準120μl No.2 + 120μl標準的な希釈剤

 

標準的な集中標準的なNo.5標準的なNo.4標準的なNo.3標準的なNo.2標準的なNo.1
128mIU/ml64mIU/ml32mIU/ml16mIU/ml8mIU/ml4mIU/ml

 

洗浄緩衝1x洗浄緩衝の600のmlをもたらすために脱イオンされるへの洗浄緩衝濃縮物30xの希薄な20mlまたは蒸留水。水晶が濃縮物で形作ったら、水晶が完全に分解したまで穏やかの組合せ。

 

結果の計算

横の(x)軸線の集中に対して縦の(y)軸線の各標準のための平均ODの計画によって標準的なカーブをグラフのポイントを通した最もよく適当なカーブを引くために組み立てれば。これらの計算はコンピュータ ベースのカーブ付属品ソフトウェアと最もよく行い、最もよく適当なラインは回帰分析によって定めることができる。

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牛のようなSDHサンドイッチELISAキットの強い感受性のソルビトールのデヒドロゲナーゼELISAテスト キット

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