96 Wells 48 Wellsの高精度および感受性のマウスのグリコーゲンのシンターゼのキナーゼ3ベータELISAキット

Brand Name:BT Lab
Certification:CE, ISO9001:2005, MSDS
Model Number:Cat.No E1251Mo
Minimum Order Quantity:Negotiation
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Place of Origin:Shanghai, China
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製品詳細

96 Wells 48 Wellsの高精度および感受性のマウスのグリコーゲンのシンターゼのキナーゼ3ベータELISAキット

 

Cat.No E1251Mo

標準的なカーブの範囲:0.05ng/ml - 30ng/ml

感受性:0.024ng/ml

サイズ:96の井戸

貯蔵:2-8°C.で試薬を貯えなさい。6ヶ月の貯蔵のために-20°C.でそれを保つために有効期限を参照しなさい。Avoid雪解け周期を繰り返した。個々の試薬が開けばキットが1か月以内に使用されることが推薦される。

*Thisプロダクトは研究の使用だけのために、ない診断のプロシージャの使用のためである。それは非常に使用の前にこの指示を完全に読むことを推薦するある。

 

意図されていた使用

このサンドイッチ キットは血清、血しょう、細胞培養のsupernates、細胞のlysates、ティッシュのホモジュネートで(別名Gsk3b)ベータ マウスのグリコーゲンのシンターゼのキナーゼ3の正確で量的な検出のためである。

 

提供される試薬

部品
標準ソリューション(40ng/ml)0.5ml x1
プリコートされたELISAの版12 * 8つの健康なストリップx1
標準的な希釈剤3ml x1
Streptavidin-HRP6ml x1
解決を停止しなさい6ml x1
基質の解決A6ml x1
基質の解決B6ml x1
洗浄緩衝濃縮物(30x)20ml x1
BiotinylatedのマウスGsk3bの抗体1ml x1
ユーザーの指示1
版のシーラー2 pics
ジッパー袋1つのpic

 

物質的な要求されるが、供給されない

  • 37°C±0.5°C定温器
  • 吸収性のペーパー
  • 精密ピペットおよび使い捨て可能なピペットの先端
  • きれいな管
  • 脱イオンされるまたは蒸留水
  • 450 ± 10nmの波長フィルターを持つMicroplateの読者

 

標本コレクション

血清は血清が室温で10-20分の間凝固するようにする。20分の2000-3000のRPMの遠心分離機。

 

血しょうは抗凝固薬としてエチレンジアミン四酢酸かヘパリンを使用して血しょうを集める。2時の2000-3000のRPMの15分の遠心分離機のサンプル-コレクションの30分以内の8°C。

 

尿は生殖不能の管によって集まる。およそ20分の2000-3000のRPMの遠心分離機。pleuroperitoneal液体および脳脊髄液を集めた場合、前述のプロシージャに続きなさい。

 

細胞培養の上澄みは生殖不能の管によって部品を分泌するために検査するとき集まる。およそ20分の2000-3000のRPMの遠心分離機。supernatantsを注意深く集めなさい。細胞内の部品を検査した場合、およそ1 million/mlの細胞の集中に細胞の懸濁液を薄くする使用PBS (pH 7.2-7.4)。中の部品を放つ繰り返されたfreeze-thaw周期を通した損傷の細胞。およそ20分の2000-3000のRPMの遠心分離機。

 

ティッシュは他の体液余分な血を完全に取除き、均質化の前に重量を量るためにPBS (pH 7.4)のティッシュを洗う。ティッシュを細かく切り刻に、氷のガラス ホモジェナイザーとのPBS (pH7.4)の均質にしなさい。2-8°Cの雪解けかおよそ20分の2000-3000のRPMの-20°C.の遠心分離機の氷結。

 

試薬の準備

すべての試薬は使用の前の室温に持って来られるべきである。

標準は20ng/ml標準貯蔵液を発生させるために標準的な希釈剤の120μlの標準(40ng/ml)の120μlを再構成する。標準が希薄を作る前に穏やかな撹拌の15分の間坐るようにしなさい。10ng/ml、5ng/ml、2.5ng/mlおよび1.25ng/ml解決を作り出すために連続的に標準的な希釈剤と標準貯蔵液(20ng/ml)の1:2を薄くすることによって重複した標準的なポイントを準備しなさい。ゼロの標準(0 ng/ml)として標準的な希釈剤のサーブ。どの残りの解決でも-20℃で凍り、1か月以内に使用されるべきである。提案される標準ソリューションの希薄は次の通りある:

20ng/ml標準的なNo.5120μl元の標準+ 120μl標準的な希釈剤
10ng/ml標準的なNo.4標準120μl No.5 + 120μl標準的な希釈剤
5ng/ml標準的なNo.3標準120μl No.4 + 120μl標準的な希釈剤
2.5ng/ml標準的なNo.2標準120μl No.3 + 120μl標準的な希釈剤
1.25ng/ml標準的なNo.1標準120μl No.2 + 120μl標準的な希釈剤

 

標準的な集中標準的なNo.5標準的なNo.4標準的なNo.3標準的なNo.2標準的なNo.1
40ng/ml20ng/ml10ng/ml5ng/ml2.5ng/ml1.25ng/ml

 

洗浄緩衝1x洗浄緩衝の500のmlをもたらすために脱イオンされるへの洗浄緩衝濃縮物30xの希薄な20mlまたは蒸留水。水晶が濃縮物で形作ったら、水晶が完全に分解したまで穏やかの組合せ。

 

概要

1. すべての試薬、サンプルおよび標準を準備しなさい。

2. 各井戸にサンプルおよびELISAの試薬を加えなさい。37°C.で1時間孵化させなさい。

3. 版を5回洗浄しなさい。

4. 37°C.で10分の基質の解決AおよびB. Incubateを加えなさい。

5. 停止する解決を加えれば色は成長する。

6. 10分以内のODの価値を読みなさい。

 

結果の計算

横の(x)軸線の集中に対して縦の(y)軸線の各標準のための平均ODの計画によって標準的なカーブをグラフのポイントを通した最もよく適当なカーブを引くために組み立てれば。これらの計算はコンピュータ ベースのカーブ付属品ソフトウェアと最もよく行い、最もよく適当なラインは回帰分析によって定めることができる。

 

Referances

「精神分裂症1で調整するGSK3beta/ベータcateninシグナリングの調節によって神経の祖先拡散を」破壊した。
毛Y.、GE X.、フランクC.L.、マディソンJ.M.、Koehler A.N.、Doud M.K.、Tassa C.の果実E.M.のソーダT.、Singh K.K.、Biechele T.、Petryshen T.L.の月R.T.、Haggarty S.J.、Tsai L.H。
細胞136:1017- 1031(2009)

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96 Wells 48 Wellsの高精度および感受性のマウスのグリコーゲンのシンターゼのキナーゼ3ベータELISAキット

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