高い特定性のラットELISAのキットのマンナンの結合のLectin 96 Wells/48 Wells

型式番号:Cat.No E0629Ra
原産地:上海、中国
最低順序量:交渉
供給の能力:ウェスタン ・ ユニオン、T ・ T
受渡し時間:1-3平日、1週以内の大量注文
包装の細部:アイスパックおよび発泡スチロールのパッケージと包まれる
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製品詳細 会社概要
製品詳細

特定性のラットのMannma高い結合蛋白質のCustomizedMannanの結合のLectin ELISAのキット

 

Cat.No E0629のRA

標準的なカーブの範囲:0.5ng/ml - 100ng/ml

感受性:0.25ng/ml

貯蔵:終わる6ヶ月の貯蔵のための2-8°C.で試薬を参照します有効期限を保ちます-20°C.のAvoidによって繰り返される雪解け周期でそれを貯えて下さい。個々の試薬が開けばキットが1か月以内に使用されることが推薦されます。

 

精密

内部試金の精密(試金内の精密)は1つの版で知られていた集中の3つのサンプル内部試金の精密を査定するためにテストされました。

相互試金の精密(試金間の精密)は別の試金で知られていた集中の3つのサンプル相互試金の精密を査定するためにテストされました。

CV (%) = SD/mean X 100

内部試金:CV<8>

相互試金:CV<10>

 

意図されていた使用

このサンドイッチ キットはラットのMannmaの結合蛋白質、血清、血しょう、細胞培養のsupernates、細胞のlysates、ティッシュのホモジュネートのマンナンの結合のLectin (別名MBP/MBL)の正確で量的な検出のためです。

 

試金の主義

このキットは酵素つながれたImmunosorbentの試金(ELISA)です。版はラットMBP/MBLの抗体とプリコートされました。MBP/MBLはサンプルで加えられ、井戸で塗られる抗体に結合します示します。そしてbiotinylatedラットMBP/MBLの抗体は加えられ、サンプルのMBP/MBLに結合します。それからStreptavidin-HRPは加えられ、Biotinylated MBP/MBLの抗体に結合します。孵化の後で解かれたStreptavidin-HRPは洗浄のステップの間に洗い流されます。基質の解決はそれから加えられ、色はラットMBP/MBLの量に比例して成長します。反作用は酸性の付加で停止します解決を終わり、吸光度は450 nmで測定されます。

 

 

注意

  • 使用前に、キットおよびサンプルは室温に30分自然に暖められるべきです。
  • この指示は実験で厳しく続かれなければなりません。
  • ストリップの望ましい数が取除かれたら、すぐに悪化から残を保護するために袋を封じ直して下さい。使用中場合のすべての試薬を覆って下さい。
  • 試薬をピペットで移した場合付加の順序そして率を十分によからのピペットで移すMake sure。
  • ピペットはひっくり返、手元の版のシーラーはクロス汚染を避けるためにきれい、使い捨て可能なべきです。
  • 異なったバッチからの試薬を一緒に使用することを避けて下さい。
  • 基質の解決Bは長い間つくためにライトに敏感、露出しません基質の解決Bをです。
  • 解決を含んでいます酸を停止して下さい。この材料を使用した場合目、手および皮保護を身に着けて下さい。キットの試薬が付いている皮または粘膜の接触を避けて下さい。
  • キットは有効期限を越えて使用されるべきではないです。

 

標本コレクション

血清は血清が室温で10-20分の間凝固するようにします。20分の2000-3000のRPMの遠心分離機。

 

血しょうは抗凝固薬としてエチレンジアミン四酢酸かヘパリンを使用して血しょうを集めます。2時で2000-3000のRPMで15分のためのサンプルを-コレクションの30分以内の8°C遠心分離機にかけて下さい。

 

尿は生殖不能の管によって集まります。およそ20分の2000-3000のRPMの遠心分離機。pleuroperitoneal流動および脳脊髄液を集めた場合、前述のプロシージャに続いて下さい。

 

細胞培養の上澄みは生殖不能の管によって検査するとき部品を分泌しなさい集まります。およそ20分の2000-3000のRPMで遠心分離機にかけて下さい。supernatantsを注意深く集めて下さい。細胞内の部品を検査した場合、およそ1 million/mlの細胞の集中に細胞の懸濁液を薄くするのにPBS (pH 7.2-7.4)を使用して下さい。中の部品を放つために繰り返された氷結雪解け周期を通して細胞を損なって下さい。およそ20分の2000-3000のRPMで遠心分離機にかけて下さい。

 

余分な血を完全に取除き、均質化の前に重量を量るべきPBS (pH 7.4)のティッシュの洗浄のティッシュ。ティッシュを細かく切り刻に、氷のガラス ホモジェナイザーとのPBS (pH7.4)の均質にして下さい。2-8°Cで分解するか、または-20°C.の遠心分離機でおよそ20分の2000-3000のRPMで凍らせて下さい。

 

注意して下さい

  • サンプル集中は試金で使用される前に予測されるべきです。サンプル集中が標準的なカーブの範囲の内になければ、ユーザーは彼らの特定の実験のための最適のサンプルを定めるために私達に連絡しなければなりません。
  • 5日以内に使用されるべきサンプルは2-8°C.サンプルでaliquotedべきまたは1か月以内の-20°Cか6か月以内の-80°Cで貯えられなければなりません貯えられるべきです。avoid氷結の雪解け周期を繰り返しました。
  • サンプルは試金を始める前の室温に持って来られるべきです。
  • 使用の前にサンプルを集める遠心分離機。
  • NaN3を含んでいるサンプルはホース ラディッシュの過酸化酵素(HRP)の活動を禁じると同時にテストすることができません。
  • supernatantsを注意深く集めて下さい。沈殿物が貯蔵の間に起こったときに、遠心分離は再度行われるべきです。
  • 溶血は試験結果の妥当性に非常に影響を与えることができます。溶血を最小にするために心配を取って下さい。

*Sampleはこのキットと薄くすることができません。キットを準備するのに材料のために私達は使用しますサンプル マトリックス干渉は不当に試金の特定性そして正確さを弱めるかもしれません。

 

概要

1. すべての試薬、サンプルおよび標準を準備して下さい。

2. それぞれにサンプルおよびELISAの試薬をよく加えて下さい。37°C.で1時間孵化させて下さい。

3. 版を5回洗浄して下さい。

4. 37°C.で10分の基質の解決AおよびB. Incubateを加えて下さい。

5. 停止します解決を加えれば色は成長します。

6. 10分以内のODの価値を読んで下さい。

 

結果の計算

標準的なカーブを横の(x)軸線の集中に対して縦の(y)軸線で標準それぞれのための平均ODの計画によって組み立て、グラフのポイントを通した最もよい適合のカーブを引いて下さい。これらの計算はコンピュータ ベースのカーブ付属品ソフトウェアと最もよく行い、最もよい適合ラインは回帰分析によって定めることができます。

 

Referances

「焦点大脳の虚血引き起こしますラットの頭脳のperi infarct区域の増加された髄鞘基本的な蛋白質そして成長準蛋白質43の遺伝子のトランスクリプションを」。は
Gregersen R.、Christensen T.、Lehrmann E.、Diemer N.H.、Finsen B。
Exp.の頭脳Res 138:384- 392(2001)

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高い特定性のラットELISAのキットのマンナンの結合のLectin 96 Wells/48 Wells

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