人間の強い感受性および特定性のアルカリ ホスファターゼのアルプスELISAのキット
Brand Name:BT Lab
Certification:CE, ISO9001:2005, MSDS
Model Number:Cat.No E0813Hu
Minimum Order Quantity:Negotiation
Delivery Time:1-3 business days, bulk order within one week
Place of Origin:Shanghai, China
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#1008.Junjiang国際的なBldg。228 Ningguo Rd. Yangpu Dist。上海。200090。中国
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製品詳細
会社概要
製品詳細
人間の強い感受性および特定性のアルカリ ホスファターゼのアルプスELISAのキット
Cat.No E0813Hu
標準的なカーブの範囲:2IU/L - 600IU/L
感受性:1.12IU/L
サイズ:96の井戸
貯蔵:2-8°C.で試薬を貯えなさい。6ヶ月の貯蔵のために-20°C.でそれを保つために有効期限を参照しなさい。Avoid雪解け周期を繰り返した。個々の試薬が開けばキットが1か月以内に使用されることが推薦される。
*Thisプロダクトは研究の使用だけのために、ない診断のプロシージャの使用のためである。それは非常に使用の前にこの指示を完全に読むことを推薦するある。
意図されていた使用
このサンドイッチ キットは血清、血しょう、細胞培養のsupernates、細胞のlysates、ティッシュのホモジュネートの人間のアルカリ ホスファターゼ（別名アルプス）の正確で量的な検出のためである。
試金の主義
このキットは酵素つながれたImmunosorbentの試金（ELISA）である。版は人間のアルプスの抗体とプリコートされた。サンプルのアルプスの現在は加えられ、抗体への縛りは井戸で塗られる。そしてbiotinylated人間のアルプスの抗体はサンプルのアルプスに縛り加えられ。それからStreptavidin-HRPは加えられ、Biotinylatedのアルプスの抗体に結合する。孵化によって解かれるStreptavidin-HRPが洗浄のステップの間に洗い流された後。基質の解決はそれから加えられ、色は人間のアルプスの量に比例して成長する。反作用は酸性の付加で停止する解決を終わり、吸光度は450 nmで測定される。
物質的な要求されるが、供給されない
- 37°C±0.5°C定温器
- 吸収性のペーパー
- 精密ピペットおよび使い捨て可能なピペットの先端
- きれいな管
- 脱イオンされるまたは蒸留水
- 450 ± 10nmの波長フィルターを持つMicroplateの読者
注意
- 使用前に、キットおよびサンプルは室温に30分自然に暖められるべきである。
- この指示は実験で厳しく続かれなければならない。
- ストリップの望ましい数が取除かれたら、すぐに悪化から残るために保護するように袋を封じ直しなさい。使用中場合のすべての試薬を覆いなさい。
- いつ試薬をピペットで移すこと十分によからの付加の順序そして率をピペットで移すMake sure。
- 手元のピペットの先端そして版のシーラーはクロス汚染を避けるためにきれい、使い捨て可能なべきである。
- 異なったバッチからの試薬を一緒に使用することを避けなさい。
- 基質の解決Bは長い間つくためにライトに敏感、露出しない基質の解決Bをである。
- 解決を含んでいる酸を停止しなさい。この材料を使用した場合目、手および皮保護を身に着けなさい。キットの試薬が付いている皮または粘膜の接触を避けなさい。
- キットは有効期限を越えて使用されるべきではない。
標本コレクション
血清は血清が室温で10-20分の間凝固するようにする。20分の2000-3000のRPMの遠心分離機。
血しょうは抗凝固薬としてエチレンジアミン四酢酸かヘパリンを使用して血しょうを集める。2時の2000-3000のRPMの15分の遠心分離機のサンプル-コレクションの30分以内の8°C。
尿は生殖不能の管によって集まる。およそ20分の2000-3000のRPMの遠心分離機。pleuroperitoneal液体および脳脊髄液を集めた場合、前述のプロシージャに続きなさい。
細胞培養の上澄みは生殖不能の管によって部品を分泌するために検査するとき集まる。およそ20分の2000-3000のRPMの遠心分離機。supernatantsを注意深く集めなさい。細胞内の部品を検査した場合、およそ1 million/mlの細胞の集中に細胞の懸濁液を薄くする使用PBS （pH 7.2-7.4）。中の部品を放つ繰り返されたfreeze-thaw周期を通した損傷の細胞。およそ20分の2000-3000のRPMの遠心分離機。
余分な血を完全に取除き、均質化の前に重量を量るべきPBS （pH 7.4）のティッシュの洗浄のティッシュ。ティッシュを細かく切り刻に、氷のガラス ホモジェナイザーとのPBS （pH7.4）の均質にしなさい。2-8°Cの雪解けかおよそ20分の2000-3000のRPMの-20°C.の遠心分離機の氷結。
*Sampleはこのキットと薄くすることができない。キットを準備するのに材料のために私達は使用するサンプル マトリックス干渉は不当に試金の特定性そして正確さを弱めるかもしれない。
試薬の準備
すべての試薬は使用の前の室温に持って来られるべきである。
標準は標準の120μlを再構成する（800IU/L） 400IU/L標準貯蔵液を発生させる標準的な希釈剤の120μlと。標準が希薄を作る前に穏やかな撹拌の15分の間坐るようにしなさい。連続的に標準貯蔵液を薄くすることによって重複した標準的なポイントを準備しなさい（400IU/L） 200IU/L、100IU/L、50IU/Lおよび25IU/L解決を作り出す標準的な希釈剤との1:2。ゼロの標準（0 IU/L）として標準的な希釈剤のサーブ。どの残りの解決でも-20°Cで凍り、1か月以内に使用されるべきである。提案される標準ソリューションの希薄は次の通りある:
| 400IU/L | 標準的なNo.5 | 120μl元の標準+ 120μl標準的な希釈剤 |
| 200IU/L | 標準的なNo.4 | 標準120μl No.5 + 120μl標準的な希釈剤 |
| 100IU/L | 標準的なNo.3 | 標準120μl No.4 + 120μl標準的な希釈剤 |
| 50IU/L | 標準的なNo.2 | 標準120μl No.3 + 120μl標準的な希釈剤 |
| 25IU/L | 標準的なNo.1 | 標準120μl No.2 + 120μl標準的な希釈剤 |
| 標準的な集中 | 標準的なNo.5 | 標準的なNo.4 | 標準的なNo.3 | 標準的なNo.2 | 標準的なNo.1 |
| 800IU/L | 400IU/L | 200IU/L | 100IU/L | 50IU/L | 25IU/L |
洗浄緩衝1x洗浄緩衝の500のmlをもたらすために脱イオンされるへの洗浄緩衝濃縮物30xの希薄な20mlまたは蒸留水。水晶が濃縮物で形作ったら、水晶が完全に分解したまで穏やかの組合せ。
結果の計算
横の（x）軸線の集中に対して縦の（y）軸線の各標準のための平均ODの計画によって標準的なカーブをグラフのポイントを通した最もよく適当なカーブを引くために組み立てれば。これらの計算はコンピュータ ベースのカーブ付属品ソフトウェアと最もよく行い、最もよく適当なラインは回帰分析によって定めることができる。
参照
「Enterocyte微分マーカー腸のアルカリ ホスファターゼ腸富ませたKruppelそっくりの要因のターゲット遺伝子」はである。
Hinnebusch B.F.、Siddique A.、Henderson J.W.、Malo M.S.、チャンW.、Athaide C.P.、Abedrapo M.A.、陳X.、ヤンV.W.、Hodin R.A。
AM.J. Physiol。Gastrointest。レバーPhysiol。286:G23- 30(2004)
Hinnebusch B.F.、Siddique A.、Henderson J.W.、Malo M.S.、チャンW.、Athaide C.P.、Abedrapo M.A.、陳X.、ヤンV.W.、Hodin R.A。
AM.J. Physiol。Gastrointest。レバーPhysiol。286:G23- 30(2004)
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