マウスACV-A ELISAのキット96 Wells 48 Wellsのための強い特定性ELISAの試金のキット

Brand Name:BT Lab
Certification:CE, ISO9001:2005, MSDS
Model Number:Cat.No E0792Mo
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製品詳細

マウスACV-A ELISAのキット96 Wells 48 Wellsのための強い特定性ELISAの試金のキット
 
Cat.No E0792Mo
標準的なカーブの範囲:10ng/L - 3000ng/L
感受性:5.43ng/L
サイズ:96の井戸

 

精密

内部試金の精密(試金内の精密)は1つの版で知られていた集中の3つのサンプル内部試金の精密を査定するためにテストされた。

相互試金の精密(試金間の精密)は別の試金で知られていた集中の3つのサンプル相互試金の精密を査定するためにテストされた。

CV (%) = SD/mean X 100

内部試金:CV<8%

相互試金:CV<10%

 

意図されていた使用

このサンドイッチ キットは血清、血しょう、細胞培養のsupernates、細胞のlysates、ティッシュのホモジュネートのマウスActivin A (別名ACV-A)の正確で量的な検出のためである。

 

試金の主義

このキットは酵素つながれたImmunosorbentの試金(ELISA)である。版はマウスACV-Aの抗体とプリコートされた。サンプルのACV-Aの現在は加えられ、抗体への縛りは井戸で塗られる。そしてbiotinylatedマウスACV-Aの抗体はサンプルのACV-Aに縛り加えられ。それからStreptavidin-HRPは加えられ、Biotinylated ACV-Aの抗体に結合する。孵化によって解かれるStreptavidin-HRPが洗浄のステップの間に洗い流された後。基質の解決はそれから加えられ、色はマウスACV-Aの量に比例して成長する。反作用は酸性の付加で停止する解決を終わり、吸光度は450 nmで測定される。


物質的な要求されるが、供給されない

  • 37°C±0.5°C定温器
  • 吸収性のペーパー
  • 精密ピペットおよび使い捨て可能なピペットの先端
  • きれいな管
  • 脱イオンされるまたは蒸留水
  • 450 ± 10nmの波長フィルターを持つMicroplateの読者

標本コレクション

血清は血清が室温で10-20分の間凝固するようにする。20分の2000-3000のRPMの遠心分離機。

 

血しょうは抗凝固薬としてエチレンジアミン四酢酸かヘパリンを使用して血しょうを集める。2時の2000-3000のRPMの15分の遠心分離機のサンプル-コレクションの30分以内の8°C。

 

尿は生殖不能の管によって集まる。およそ20分の2000-3000のRPMの遠心分離機。pleuroperitoneal液体および脳脊髄液を集めた場合、前述のプロシージャに続きなさい。

 

細胞培養の上澄みは生殖不能の管によって部品を分泌するために検査するとき集まる。およそ20分の2000-3000のRPMの遠心分離機。supernatantsを注意深く集めなさい。細胞内の部品を検査した場合、およそ1 million/mlの細胞の集中に細胞の懸濁液を薄くする使用PBS (pH 7.2-7.4)。中の部品を放つ繰り返されたfreeze-thaw周期を通した損傷の細胞。およそ20分の2000-3000のRPMの遠心分離機。

 

余分な血を完全に取除き、均質化の前に重量を量るべきPBS (pH 7.4)のティッシュの洗浄のティッシュ。ティッシュを細かく切り刻に、氷のガラス ホモジェナイザーとのPBS (pH7.4)の均質にしなさい。2-8°Cの雪解けかおよそ20分の2000-3000のRPMの-20°C.の遠心分離機の氷結。

 

試薬の準備
すべての試薬は使用の前の室温に持って来られるべきである。

標準は1.2ng/ml標準貯蔵液を発生させるために標準的な希釈剤の120μlの標準(2.4ng/ml)の120μlを再構成する。標準が希薄を作る前に穏やかな撹拌の15分の間坐るようにしなさい。0.6ng/ml、0.3ng/ml、0.15ng/mlおよび0.075ng/ml解決を作り出すために連続的に標準的な希釈剤と標準貯蔵液(1.2ng/ml)の1:2を薄くすることによって重複した標準的なポイントを準備しなさい。ゼロの標準(0 ng/ml)として標準的な希釈剤のサーブ。どの残りの解決でも-20°Cで凍り、1か月以内に使用されるべきである。提案される標準ソリューションの希薄は次の通りある:

 

1600ng/L標準的なNo.5120μl元の標準+ 120μl標準的な希釈剤
800ng/L標準的なNo.4標準120μl No.5 + 120μl標準的な希釈剤
400ng/L標準的なNo.3標準120μl No.4 + 120μl標準的な希釈剤
200ng/L標準的なNo.2標準120μl No.3 + 120μl標準的な希釈剤
100ng/L標準的なNo.1標準120μl No.2 + 120μl標準的な希釈剤

 

標準的な集中標準的なNo.5標準的なNo.4標準的なNo.3標準的なNo.2標準的なNo.1
3200ng/L1600ng/L800ng/L400ng/L200ng/L100ng/L

 
洗浄緩衝1x洗浄緩衝の500のmlをもたらすために脱イオンされるへの洗浄緩衝濃縮物30xの希薄な20mlまたは蒸留水。水晶が濃縮物で形作ったら、水晶が完全に分解したまで穏やかの組合せ。
 
概要

1. すべての試薬、サンプルおよび標準を準備しなさい。

2. 各井戸にサンプルおよびELISAの試薬を加えなさい。37°C.で1時間孵化させなさい。

3. 版を5回洗浄しなさい。

4. 37°C.で10分の基質の解決AおよびB. Incubateを加えなさい。

5. 停止する解決を加えれば色は成長する。

6. 10分以内のODの価値を読みなさい。
 

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マウスACV-A ELISAのキット96 Wells 48 Wellsのための強い特定性ELISAの試金のキット

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