ElisaサンドイッチToxoplasmaのGondiiテスト キットはIgMの抗体37°Cの湿気のある部屋を検出します

高精度な96wells Toxoplasmaのgondii （Toxo）のIgM ELISAテスト キットElisaサンドイッチ方法


製品名: Toxoplasmaのgondii （Toxo）のIgM ELISAテスト


意図されていた使用:

Toxoplasmaのgondii （酵素つながるToxo） IgM - Immunosorbentの試金（ELISA）は激しく、最近かまたは反応Toxoplasmaのgondiiの伝染の推定診断のための人間の血清のToxoplasmaのgondiiへのIgMの抗体の推定質的な検出のために意図されています。忍耐強い血清のテストは反ToxoplasmaのgondiiのIgGの抗体の試金と共に行われなければなりません。このプロダクトはテスト（すなわち、スクリーニング）の血または血しょう提供者の使用のために（承認される）取り除かれるFDAではないです。試金の性能は出生前の女性か新生児の選別のために確立されませんでした。高い複雑さテスト。

概要:

T.のgondiiはほ乳類および鳥の多くの種類で伝染を引き起こすprotozoanによりです。トキソプラスマ症は人間で、度々行き、動物は、もっと普通無声です。血清学テストを使用して確立される人口のこの伝染の流行はおよび年齢生産国によって異なるかもしれません。妊娠の間のトキソプラスマ症は深刻な生来異常（特に、損なわれた頭脳機能）および時々死産で関係しました。概念前の女性のToxo IgGの抗体のデモンストレーションは妊娠の間に可能なトキソプラスマ症からの胎児保護の保証を提供します。厳しいトキソプラスマ症の伝染への性質はまたはだれが他ではimmunocompromisedかエイズ(AIDS)持つために知られている人で共通です。これらの伝染はHIV感染前に現在のT.のgondiiの包嚢の再活動化が主に原因です。T.のgondiiの伝染の特定の診断は複雑である場合もあり、寄生虫の分離はまれです。T.のgondiiの抗体の血清学の確認は寄生虫への露出を表して、として広く受け入れられるように伝染への免疫の状態そして感受性を定める手段をなりました。複数のisotypesのスクリーニングは最近の伝染の場合には適切な療法のT.のgondiiそして実施の交際または予防する推薦の提案を可能にします:immunocompromised人口でchemoprophylaxy妊婦の衛生学食事療法の指針。

テストの原則:

酵素つながれたImmunosorbentの試金（ELISA）は生物的材料（例えば、抗原）の機能にポリスチレン（固相）のようなプラスチック表面に吸着する頼ります。固相に区切られる抗原が患者の血清、抗原の特定の抗体が付いている接触にもしあれば、持って来られる場合、抗原抗体の複合体を形作る固相の抗原に結合します。余分な抗体は洗浄によって取除かれます。これは反抗体抗原の複合体に結合する西洋わさびの過酸化酵素と活用されるヤギの付加に-人間のIgMのグロブリン先行しています。余分な共役は色原体/基質のtetramethylbenzidine (TMB)の付加に先行している洗浄によって取除かれます。抗原への特定の抗体が患者の血清にあれば、青い色は成長します。酵素の反作用が1N H2SO4と停止するとき、井戸の内容は黄色い回ります。血清の抗体の集中を表している色は適した分光光度計またはELISAのmicrowellの版の読者で読むことができます。

キットの部品

試金プロシージャ

1. ストリップが付いている真空閉鎖したアルミニウム袋が室温に達するようにして下さい。ストリップの十分な数を撤回し、提供された袋に未使用のストリップを入れ、そして中保たれるdesiccantとそれを注意深く密封して下さい。
2. 版のレイアウトのピペットで移す機構に従う井戸へのサンプル希釈剤、制御および血清のサンプルのピペット100のµL:反作用の背景を定めるために希薄の緩衝で第1を（DIL）よく満たして下さい。口径測定器1 （CAL 1）で次の2つの井戸を満たして下さい。次の井戸は口径測定器2-4 （CAL 2-4）および否定的な制御（制御1）で満ちます。残りの井戸は薄くされた血清のサンプル（S1…）で満ちます。1の井戸（S1、S2、S3…）に1つの血清を加えることは満足です。但し実験室の間違いを最小にしたいと思ったら二重項として制御およびサンプルを加えて下さい。カバー膜かカバーでストリップをカバーして下さい。
3. 湿気のある部屋の37°Cで60分（+/- 5 min.）を孵化させて下さい。
4. 適切な殺菌剤を含んでいる収集のびんに井戸からの液体を吸い出して下さい（危害予防を見て下さい）。井戸を洗浄緩衝の300 µl/wellの4回洗浄し、吸い出して下さい。井戸間のクロス汚染を避けて下さい!液体が井戸に残ったら、版を逆にし、最後の残りの低下を取除くために吸着性のペーパーの叩いて下さい。
5. それぞれに100つのµLの過酸化酵素の共役r.t.uをよく加えて下さい。湿気のある部屋の37°Cで30分を（+/- 2分）孵化させて下さい。
6. 洗浄緩衝の300 µl/wellの4回を吸い出し、洗浄して下さい。
7. それぞれにTMBの100 µlをよく分配して下さい。室温で15分（+/- 30秒）を孵化させて下さい。時間の測定は分配するTMBの始めに始まらなければなりません。ストリップを不透明なカバーでカバーするか、または暗闇でTMBの孵化の間に保って下さい。
8. µLがの解決を停止する100つを加えることによって反作用を停止して下さい。すべての井戸の同じ点爆時間を保障するTMBのと同じピペットで移すリズムを使用して下さい。試薬の完全な混合を保障する数回のためのmicroplateを穏やかに叩いて下さい。
9. 10分以内のmicroplateの読者との450 nmで吸光度を読んで下さい。630 （620） nmで参照の読書を使用することを推薦します。