チロキシンT4 Elisaの2つの標準的なカーブの範囲が付いている診断キット血しょうサンプル

、量的な測定のためのElisaサンドイッチ方法高精度な、チロキシンT4 ELISAテスト

製品名:チロキシンT4 ELISAテスト

意図されていた使用:

チロキシンの(T4)のキットは量的に血清、血しょう（エチレンジアミン四酢酸およびヘパリン）、尿、得られた乾燥された糞便のサンプルおよびティッシュのculturemediaのT4現在を測定するように設計されています。このキットは血清、血しょうおよび得られた糞便のサンプルのtotalT4を測定します。T4は種の独立者です。

概要:

チロキシンは甲状腺によって作り出される主要なホルモンです。甲状腺ホルモン、triiodothyronine (T3)およびチロキシン(T4)は、甲状腺によって作り出される新陳代謝の規則に一義的な責任があるチロシン ベースのホルモンです。ヨウ素はT3およびT4の生産に必要です。ヨウ素の不足はT3およびT4の減らされた生産をもたらし、甲状腺剤のティッシュを拡大し、そして甲状腺腫として知られている病気を引き起こします。血の甲状腺ホルモンの主要な形態はT3より長い半減期があるチロキシン(T4)です。T4への血に解放されるT3の比率は細胞内の活動的なT3にdeiodinases （5' - iodinase）によって大体20から1. T4変えられます（3から4 T4より有効倍）です。これらは脱カルボキシル化およびdeiodinationによって更にiodothyronamine （T1a）およびthyronamine （T0a）を作り出すために処理されます。deiodinasesの3つのisoformsはすべて酵素をセレニウム含んでいます、従って食餌療法のセレニウムはT3生産のために必要です。甲状腺機能低下症は腺が自然にunderactiveであるか、または過剰に活動する腺のためのradioiodineの療法か外科がunderactivityで起因したので甲状腺によってチロキシンの以下生産にどちらか起因する条件です。チロキシンは取り替えそのような状況である、従って正常な新陳代謝の活動を取られます不足を元通りにするために。甲状腺ホルモンの生産は酵素に影響を及ぼす新陳代謝のでき事によって周辺ティッシュのtriiodothyronineの(T3)の活動的な生産の甲状腺そして規則によってチロキシンの(T4)のprohormoneの分泌のthyrotropinの(TSH)下垂体の調節によって調整されます。

テストの原則:

キットは2つの標準的なカーブの範囲を提供します。血清および血しょうサンプルのために、私達は標準またはサンプルの10 µLを使用することを推薦します。T4のための試金の集中範囲は50 ng/mlから0.781 ng/mlからです。尿サンプルのために、私達は代わりに標準の100 µLを使用することを推薦するか、または4 ng/mlから0.0625 ng/mlまで及ぶT4の集中を見本抽出します。

T4貯蔵液は試金のための標準的なカーブを発生させるために提供され、すべてのサンプルは標準的なカーブを離れて読まれるべきです。標準か薄くされたサンプルはマウスの抗体を捕獲するために抗体が塗られる明確なマイクロ プレートにピペットで移されます。T4過酸化酵素の共役は井戸の標準そしてサンプルに加えられます。結合の反作用はそれぞれへのモノクローナル抗体toT4の付加によってよく始められます。1時間の孵化が版および洗浄された後基質は加えられます。基質は縛られたT4過酸化酵素の共役と反応します。短い孵化の後で、反作用は停止し、発生させた色の強度は450nm波長を測定することができるマイクロ プレートの読者で検出されます。サンプルのT4の集中はほとんどの版の読者と利用できるソフトウェアを使用してサンプルの希薄のための適した訂正後、計算されます。

キットの部品

1. Microtiterwellsの12 x 8つの（離れて壊して下さい）ストリップ、96の井戸;WellsはTreponema - pallidum抗原と塗りました。（incl。1つのストリップのホールダーおよび1つのカバー ホイル）
2. Pos. Controlの***、mL使用可能な1つのガラスびん、1.0;黄色、赤い着色される帽子。
3. Neg。***、mLを使用可能な1つのガラスびん、2.0制御して下さい;黄色、黄色の着色される帽子。
4. 締切り制御***、mL使用可能な1つのガラスびん、1.0;黄色、黒い着色される帽子。
5. 酵素の共役**、mL使用可能な1つのガラスびん、13の
6. 基質の解決、mL使用可能な1つのガラスびん、14のTetramethylbenzidine (TMB)。
7. 解決、mLを使用可能な1つのガラスびん、14の停止して下さい0.2 mol/l H2SO4を含んでいましたり、停止解決が付いている接触を避けます。それにより皮膚のかぶれおよび焼跡を引き起こすかもしれません。
8. 洗浄解決*、1つのガラスびん、30のmL （600のmLのために集中される20X）、pH 7.2の± 0.2は試薬の„の準備を「見ます。

* 0.03% ProClin 300を含んでいます

** 0.03% ProClinを300 + 0.01%のゲンタマイシンの硫酸塩含んでいます

***は0.03% ProClinを300 + 0.015%の5 bromo 5ニトロ1,3ジオキサン（2メチル2H isothiazol 3 1 BND） + 0.010%含んでいます（MIT）

試金プロシージャ

動くそれぞれは標準的なカーブを含まなければなりません。

1. フレームのホールダーのMicrotiterの井戸の望ましい数を保証して下さい。

2. 適切な井戸に新しく使い捨て可能な先端の各標準、制御およびサンプルの10 µLを分配して下さい。

3. 室温（18 °C – 25 °C）で5分の間孵化させて下さい。

4. それぞれに100つのµLの酵素の共役をよく分配して下さい。

完全に10秒の間混合して下さい。このステップの完全な混合を持っていることは重要です。

5. 室温（18 °C – 25 °C）で80分の間孵化させて下さい。

6. 活発に井戸の内容を揺すって下さい。

井戸を薄くされた洗浄解決（井戸ごとの400 µL）との5回洗って下さい。残りのしぶきを取除くために吸収性のペーパーで井戸をはっきりと打って下さい。

要注意事項:

この試金の感受性そして精密は洗浄プロシージャの正しい性能によって著しく影響を及ぼされます!

1. それぞれに基質の解決の100 µLをよく加えて下さい。

2. 室温で10分の間孵化させて下さい（18 °Cは– 25 °C）室温（29以上°C）で5分の間室温（26 °C –で7分の間孵化させて下さい29 °C）孵化します

3. µLがのそれぞれに解決をよく停止する100つを加えることによって酵素の反作用を停止して下さい。

4. マイクロ プレートの読者との450 ±でよくそれぞれの吸光度（OD）を10 nm定めて下さい。

井戸が10分以内に停止解決をことを加えた後読まれることが推薦されます。