TriiodothyronineT3 Elisaのキット テスト ヤギ-反マウスの抗体の上塗を施してあるMicrotiter Wells

、量的な測定のためのElisaサンドイッチ方法高精度な、TriiodothyronineT3 ELISAテスト

製品名:TriiodothyronineT3 ELISAテスト

意図されていた使用:

この総T3 EIAは人間の血清のtriiodothyronineの(T3)の集中の量的な決定のために意図されています。このテストは甲状腺機能亢進症のような甲状腺疾患の診断そして処置に有用です。

概要:

血清のtriiodthyronineの集中の測定は甲状腺剤の機能障害の診断の貴重な用具と一般にみなされます。この重要性は最後の二十年に起こった試金の方法の重要な改善に原動力を提供しました。T3結合の血清蛋白質への妨害代理店のmonospecific抗血清そして発見の出現は手続き型に簡単な放射免疫測定の開発を可能にしました

テストの原則:

Triiodthyronine総(T3) ELISAのキットは競争の結合の原則に基づく固相の酵素つながれたimmunosorbentの試金（ELISA）です。microtiterの井戸はpolyclonalヤギ反マウスの抗体が塗られます。標準、制御および忍耐強い血清はmonoclonal反T3抗体を含んでいる試金の試薬とともに孵化します。共役との次の孵化で忍耐強いサンプルの内生T3は溶けにくくされた結合場所の限られた数のためにT3西洋わさびの過酸化酵素の共役と競います。孵化の後で自由な共役は洗浄されます。縛られた過酸化酵素の共役の量はサンプルのT3の集中に反比例しています。基質の解決の付加の後で、開発される色の強度は忍耐強いサンプルのT3の集中に反比例しています。

キットの部品

1. Microtiterwellsの12 x 8つの（離れて壊して下さい）ストリップ、96の井戸;WellsはTreponema - pallidum抗原と塗りました。（incl。1つのストリップのホールダーおよび1つのカバー ホイル）
2. Pos. Controlの***、mL使用可能な1つのガラスびん、1.0;黄色、赤い着色される帽子。
3. Neg。***、mLを使用可能な1つのガラスびん、2.0制御して下さい;黄色、黄色の着色される帽子。
4. 締切り制御***、mL使用可能な1つのガラスびん、1.0;黄色、黒い着色される帽子。
5. 酵素の共役**、mL使用可能な1つのガラスびん、13の
6. 基質の解決、mL使用可能な1つのガラスびん、14のTetramethylbenzidine (TMB)。
7. 解決、mLを使用可能な1つのガラスびん、14の停止して下さい0.2 mol/l H2SO4を含んでいましたり、停止解決が付いている接触を避けます。それにより皮膚のかぶれおよび焼跡を引き起こすかもしれません。
8. 洗浄解決*、1つのガラスびん、30のmL （600のmLのために集中される20X）、pH 7.2の± 0.2は試薬の„の準備を「見ます。

* 0.03% ProClin 300を含んでいます

** 0.03% ProClinを300 + 0.01%のゲンタマイシンの硫酸塩含んでいます

***は0.03% ProClinを300 + 0.015%の5 bromo 5ニトロ1,3ジオキサン（2メチル2H isothiazol 3 1 BND） + 0.010%含んでいます（MIT）

試金プロシージャ

1. フレームのホールダーのMicrotiterの井戸の望ましい数を保証して下さい。

2. 適切な井戸に新しく使い捨て可能な先端の各標準、制御およびサンプルの10 µLを分配して下さい。

3. 室温（18 °C – 25 °C）で5分の間孵化させて下さい。

4. それぞれに100つのµLの酵素の共役をよく分配して下さい。

完全に10秒の間混合して下さい。このステップの完全な混合を持っていることは重要です。

5. 室温（18 °C – 25 °C）で80分の間孵化させて下さい。

6. 活発に井戸の内容を揺すって下さい。

井戸を薄くされた洗浄解決（井戸ごとの400 µL）との5回洗って下さい。残りのしぶきを取除くために吸収性のペーパーで井戸をはっきりと打って下さい。

パフォーマンス特性

1.感受性

この総T3 EIAテストの感受性は0 ng/mLの標準の吸光度の95%の信頼限界から計算されるように0 ng/mLから顕著である場合もあるT3の最も低い集中と定義されます。この方法は確実に0.2 ng/ml低いT3集中を検出します。

2.精密

a. 内部試金の精密

の中運営の精密は1つの試金の3つの制御血清の反復同音の決定によって定められました。

b. 相互試金の精密

間運営の精密は一連のそれぞれ目盛りを付けられた試金上の3つの血清のサンプルの反復同音の測定によって定められました。

3.回復および直線性の調査

a. 回復

知られていたT3レベルのさまざまで忍耐強い血清のサンプルは正副2通りに結合され、試金されました。中間の回復は106%でした。

中間の回復#2 = 111%

1. 直線性

2つのサンプルはゼロT3標準と連続的に直線性を定めるために薄くなりました。中間の回復は99%でした。

平均= 101%