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HBeAbの抗体ELISAテストは反HBe抗体、96wells/kitの量的な測定のためのElisaサンドイッチ方法を、検出します
製品名:
HBeAbの抗体ELISAテスト キット
反HBe抗体ELISAテスト キット
意図されていた使用:
反HBeAg抗体(HBeAb) EIAは人間の血清または血しょうの肝炎のウイルス(HBe)のeの抗原へ抗体の検出のための質的な酵素の免疫学的検定です。
概要:
肝炎ウイルスeの抗原に対する抗体の存在は(1)ウイルスの写しのピークの前のHBsの早いantigenemiaおよび(2)早い療養のために表示器としてHBeAgが探索可能なレベルの下で低下したら使用されます。seroconversionを確認することもまた有用です。HBeAgの確実からの反HBe確実へのseroconversionはウイルスの写しが減ったので伝染性のウイルスの減らされたレベルを示します。
反HBe抗体テストは標本からの反HBe抗体が井戸に加えられる中和の試薬のHBeAgの限られた数のために西洋わさびの過酸化酵素の(HRP)によって活用される反HBe抗体の一定した量と競う競争の酵素の免疫学的検定です。microtiterの井戸はHBeAgのためのキャッチャーとしてHBeAgに対するpolyclonal抗体が塗られます。血清の標本はHRPによって活用される反HBe抗体とともにmicrotiterの井戸、また中和の試薬のHBeAgに加えられます。孵化の後で、標本の反HBe抗体は、もしあれば、井戸にHBeAgの限られた量のためにHRP活用された反HBeの一定した量と加えました競います。自由な酵素の共役は洗い流され、過酸化水素を含んでいる色原体の基質の解決は色の開発のための井戸に加えられます。従って、井戸へのHRP活用された反HBe限界の量は標本の反HBe抗体の集中に反比例しています。制御および標本の吸光度は450 nmで置かれる波長のEIAの読者を使用して断固としたです。
提供される理事
1. Microtitreは版(96の井戸) – 1に塗りませんでした
2.人間のビオチンの共役、1ml – 1つのガラスびん
3.標準、3200U/L、0.5ml – 1つのガラスびん
4. Streptavidin HRPの共役、- 6つのml
5.洗浄緩衝(30X) – 20ml
6.標準的な希釈剤– 3ml
7.基質A – 6ml
8.基質B – 6ml
9.解決– 6ml停止して下さい
10.使用説明書
主義をテストして下さい
この試金はサンドイッチによって酵素つながれるimmunosorbentの試金(ELISA)に基づいています。肝炎のウイルスeに対して抗体を含んでいるサンプルは井戸のプリコートされた抗原の肝炎のウイルスeと反応します。孵化の後で、ビオチンは抗原を分類しました(肝炎のウイルスe)は井戸に加えられます。Streptavidin-HRPは免疫の複合体を形作るために加えられます。孵化の後で自由な複合体を取除くために、洗浄はされます。TMBの基質は井戸に加えられます。加水分解された基質の量はmicroplateの読者で読まれ、肝炎のウイルスE.に対して抗体の集中に正比例しています。
試験手順
1.すべての試薬が使用の前に室温に達するようにして下さい。
2.それぞれの井戸に標本、肯定的な制御、また否定的な制御の1つの低下を(50 ul)分配して下さい。
3.よくそれぞれに酵素の共役の1つの低下を(50 ul先行している)、中和の理事の1の低下(50 ul)に加えて下さい。2 min.の平らなベンチの渦巻くことによってマイクロ プレートそれらを穏やかに混合して下さい。
4.マイクロ プレートを湿らせられた箱に置き、60 min.の37o Cで孵化させて下さい。
5. それぞれを薄くされた洗浄緩衝でのよく満たし、そして吸収性のペーパーですべての水を活発に逆にし、そしてそれぞれの縁をよく妨げることによってそれぞれを井戸6回出すために版を数秒間洗浄して下さい。
6.基質の解決Aの1つの低下を(50 ul)よくそれぞれに加え、そしてよくそれぞれに基質の解決Bの1つの低下を(50 ul)加えて下さい。穏やかに混合し、15 min.の室温で孵化させて下さい。
7.それぞれの色反作用の目視検差はそれぞれに井戸またはよく停止します色反作用を停止するために解決をの1つの低下を(50 ul)加えます。450 nmのすべてのサンプルの空白制御井戸そしてそれから読まれたO.D.の価値の空白EIAの読者。
パフォーマンス特性:
以下の事項に注意して下さい:この確認は私達の実験室で行われ、あなたの実験室で必ずしも重複しません。このデータはユーザーが試金の下検分およびキットの特徴を得ることを可能にするように発生し、実際のところ一般的です。私達はユーザーが少くとも行うことを推薦します;スパイクおよび回復試金および質の結果を保証するdilutionalの直線性の試金。広範囲の確認のために、ユーザーはキットと使用されるべき品質管理のための変数を開発するために私達によってここに提案されるように次議定書を動かすかもしれません。
感受性:検出の限界:それは『0"の平均の信号に相当してように最も低く探索可能な集中2* SDと標準定義されます。『0"の10の反復実験は標準評価され、LODは10のU/L.であると見つけられました。
精密:
内部試金の精密:低く、中間高レベル人間HBeAbが付いている3つのサンプルは20回1つの版の、それぞれテストされました。
相互試金の精密:低く、中間高レベル人間HBeAbが付いている3つのサンプルは3つの版、各版の8つの反復実験でテストされました。CV (%) = SD/mean Xの100内部試金:CV<10>
Ver1.0 5
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