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高精度な鳥インフルエンザH9N1の抗体ELISAテスト キット、96wells/kitのproffesionalの使用
1.報告書
鳥インフルエンザ(鳥インフルエンザ、AI)は国内家禽工業に対して現在激しい接触の性病の毒性感染症です。ワクチン接種は免疫がある後それを防ぎ、制御する効果的な方法抗体のレベル反映します鶏の群の鳥インフルエンザのウイルスへの免疫の抵抗に直接関連していたワクチン接種の効果をでした。
このプロダクトは異なった種類、鶏の血清のH9N1の特定の抗体の検出の別の年齢に適当です。それは分析、免疫の効果、免疫の状態のH9N1の鶏の評価のH9N1ウイルスのワクチン接種の免疫の時間に使用することができます。
2.主義
キットは間接酵素の免疫学的検定(間接ELISA)に基づいています。抗原は版で上塗を施してあります。サンプル血清がウイルスに対して特定の抗体を含んでいる場合、版の抗原に結合します。自由な抗体および他の部品を洗浄して下さい。それから特定の酵素の共役を加えて下さい。孵化および洗浄の後で、TMBの基質を加えて下さい。比色反作用は、分光光度計(450 nm)によって測定されて現われます。
3.部品
1 | H9N1抗原の上塗を施してあるmicroplate | 96T×1 |
2 | 酵素の共役 | 11ml×1 |
3 | サンプル希釈剤 | 50ml×1 |
4 | 基質A | 6 ml×1 |
5 | 基質B | 6 ml×1 |
6 | 20xによって集中される洗浄の解決 | 40 ml×1 |
7 | 肯定的な制御 | 1.0 ml×1 |
8 | 否定的な制御 | 1.0 ml×1 |
9 | 解決を停止して下さい | 6 ml×1 |
10 | 付着力ホイル | 1部分 |
11 | 密封された袋 | 1部分 |
12 | 指示 | 1部分 |
4. サンプル準備
1) 動物の全血を取らないで下さい、規則的な方法、明確、溶血である、血清の必要性によって血清を汚染得て下さい。短期貯蔵のために、サンプルは-20℃でで2~8℃、長期保管のために、貯えることができます。
2) 100時にサンプル希釈剤が付いている希薄な血清(のような198μlサンプル希釈剤、混乱に2μl血清を均等に加えて下さい)。肯定的な制御および否定的な制御は希薄必要としません。
3) 20xによって集中される洗浄の解決を室温(約25℃)に使用の前に戻して下さい、沈殿させた塩を分解するために揺すりそして蒸留水か脱イオンされた水と20時にそれを薄くして下さい。
5. 試験手順
1) 使用の前に30minsのための室温にキットを戻して下さい。
2) 必要な量のmicroplateをよく取って下さい、空白制御の1つを、否定的な制御の2つの井戸よく、肯定的な制御の2つの井戸よくよくよく置いて下さい、未使用の版を密封して下さい、2~8℃で貯えて下さい。
3) 空白制御に100ulサンプル希釈剤をよく加えて下さい。否定的な制御に否定的な制御を、100μl/wellの肯定的な制御への肯定的な制御、100μl/wellよくよく加えて下さい;よのサンプルのために、薄くされた血清100μl/wellを加えて下さい;
4) 30分の37 ℃で、孵化均等に混合して下さい。
5) 井戸の液体を放棄し、洗浄の解決ですべての井戸を満たし、30sのために孵化させ、そして放棄して下さい。洗浄プロシージャを乾燥する、軽打同様に上で5倍繰り返して下さい。
6) 各に酵素の共役を、100μl/wellよく加えて下さい。(空白制御井戸を除いて)
7) 30分の37 ℃の孵化。
8) ステップ5)として洗浄。
9) 基質A 50μl/wellを加えて下さい、そして基質B 50μl/wellは10分の暗闇の37 ℃で、孵化均等に混合します。
10) 停止しましたり解決50μl/wellを、均等に混合しましたり、よくそれぞれの450nm (参照として630nm)でAの価値を測定するのに使用しますELISAの読者を加えて下さい。
6. 結果
1) 否定的な制御井戸:常態では、否定的な制御井戸≤0.20のAの価値;
2) 肯定的な制御井戸:常態では、肯定的な制御井戸≥0.60のAの価値;
3) C.Oの価値の計算:否定的な制御井戸の平均が0.07より低いいつかC.O= 0.13 +否定的な制御井戸の平均(0.07として計算して下さい)
4) 結果の裁判官:
サンプルA450 ≥C.Oが、結果肯定的である時;
A450時
7. 限定
キットは鶏血清または血しょうのH9N1 IgGの抗体しか質的に検出なできます。粗野な評価をAの価値に基づいて抗体のレベルの強く、中型弱くして下さい。
8. ノート
1) 消毒および分離システムを厳しく作動させ、鳴り、そして行いなさい時手袋および仕事着を身に着けて下さい。
2) 停止解決は触れられたら腐食性で、接触皮および衣服の水道水が付いている洗浄を避けます。
3) Microplateは冷やされていた環境から室温で乾燥するべきバランスべきで密封しますdesiccantが付いている未使用のmicroplateを取除きました。
4) 洗浄解決は低温で容易に分解するのに使用されたとき、室温に戻るために結晶します。
5) 洗浄することができない開口部の酵素を自由に防ぐためにそれぞれに洗浄の解決を井戸、十分に加えて下さい
6) テスト サンプルは新しいですべきです。
7) 試験結果の決定はELISAの読者に基づいていなければなりません。
8) 決して異なったバッチからの試薬を混合しないで下さい。
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