ELISA試験プロトコル
使用する個々のストライプとアリクォート反応剤を次の例でラベルする.
| 構成要素 |
反応単位での容量 |
24 反応 |
| カナマイシン抗体# |
50uL |
1.2mL |
| HRP結合 Ab #2 |
50uL |
1.2mL |
| 1X 洗剤 |
10.0 mL |
24mL |
| バッファー停止 |
100L |
2.4 ml |
| TMB 基板 |
100L |
2.4 ml |
- 各カンナミシン標準の 50 IU を 2 枚ずつ異なる井戸に加える (低濃度から高濃度までの順序でのみ基準をプレートに加える).
- 各サンプルから50Lを2回分に異なるサンプルプーンに追加する.
- 各井戸にHRP結合Ab#2の50IUとカンナミシン抗体#1の50IUを加える.プレートを手動で30秒間軽く揺さぶることでよく混ぜる.
- 室温で30分間保育します (20°C/ 68°F).育卵 期間 直接 の 日光 や 寒い ベンチ 上 面 を 避ける.育卵 期間 に マイクロ ティータ プレート を 覆う こと が 推奨 さ れ ます.) について
- 1X洗剤の250Lで4回洗います.最後の洗浄後,皿を逆向きに洗い,紙タオルで薄く乾燥させましょう. (皿を洗った直後に次のステップを実行します.作業段階の間には,プレートが空気中に乾燥させてはならない).
- 100LのTMB基質を加える. 基質を加えた直後に反応をタイムする. 溶液を混ぜ, 30秒間手動でプレートを柔らかく揺さぶる.潜在的汚染を避けるため,原容器に戻さないでください.色を呈する材料溶液は劣化を示し,廃棄する必要があります.発育中にマイクロタイタープレートを覆うことが推奨されます.) について
- 室温で15分間保育した後 (20 25°C / 68 ̇ 77°F について酵素反応を停止するために,ストップバッファの100IUを追加します.
- 450 nm 波長のプレートリーダーでストップバッファを追加した後,できるだけ早くプレートを読み取ります (読み取れる前に,プレートの底部に毛糸のない拭き用紙を塗り,水分や指紋が測定に干渉しないようにします).
