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牛のようなヤギのヒツジのブタおよび犬96Wells/Kitのためのブルセラ症の抗体ELISAのキット
1. 導入
ブルセラ症の抗体ELISAのキットがウシ、ヤギ、ヒツジ、ブタおよび犬等の血清のブルセラ症の抗体をテストするのに使用されている。
このキットは酵素のマイクロよストリップで競争ELISA方法、ブルセラ症の抗原を使用するためにプリコートされる。テストした場合、ブルセラ症の特定の抗体があったら、孵化の後で、薄くされた血清のサンプルを、それ結合するプリコートされた抗原と、洗浄の非結合抗体そして他の部品を放棄するために加えなさい;それからモノクローナル抗体およびプリコートされた抗原の組合せを妨げるために酵素によって分類される反ブルセラ症のウイルスのモノクローナル抗体、サンプルの抗体を加えなさい;洗浄の非結合酵素の共役を放棄しなさい;酵素の触媒作用によってマイクロ井戸のTMBの基質を、停止解決を反作用を停止するために加えた後吸光度を反作用の井戸の価値測定する青い信号あるサンプル、450nm wavelenthの使用ELISA読者の抗体の内容の反対の割合に加えなさい。
2. 試薬および目次
コード | 項目 | Spec. | コード | 項目 | Spec. |
1 | ブルセラ症Agは版96wellsに塗った | 1/2の版 | 7 | 解決を停止しなさい | 15のml |
2 | 酵素の共役 | 10/20のml | 8 | 否定的な制御 | 200 ul |
3 | 10Xは洗浄の緩衝を集中した | 100つのml | 9 | 肯定的な制御 | 60 ul |
4 | 基質 | 11/22のml | 10 | 付着力ホイル | 2/4部分 |
5 | サンプル希釈剤 | 100つのml | 11 | 説明書 | 1部分 |
6 | 血清の希薄の版 | 1/2の部分 |
3. 必要な材料は提供しなかった
1) Micropipette:10ul-100ul、100ul-1000ul。
2)使い捨て可能なピペットの先端。
3)卒業生:500ml.
4) Microplateの読者:96の井戸。
5)蒸留水か脱イオンされた水。
6) Microplateの洗濯機
4. サンプル準備
動物の全血を、得る規則的な方法の使用によって血清を明るいもし、溶血無し、血清取りなさい。
5. 洗浄の緩衝準備
塩の水晶があれば、リターン10Xは使用の前に室温に分解した洗浄の緩衝を揺れるそれを作るためにそしてそれ蒸留水との10時に希薄または脱イオンされた水集中した。薄くされた洗浄の緩衝は4℃forで貯えることができる約1週。
6. ノート
1) すべての試薬を室温に使用の前に戻しなさい、2-8°Cで使用の後で使用および店をよりかなり前に揺すりなさい。
2)は混合しない使用の間に試薬が汚染されることを防ぐために異なったキットおよびバッチからの試薬を。
3)基質および停止解決は皮に刺激するかもしれ、目は、慎重に使用する。
4)は強いライト--に基質をさらさないし、酸化代理店が付いている接触を避けない。
5)ブルセラ菌は湿気に対して版を密封されるべきである銀めっきした。ホイル袋を乾燥し、2-8 °C.で密封するためにMicroWellの未使用の版を戻しなさい。
6)すべての無駄は汚染を避けるよりかなり前に扱われた処分べきである。
7)厳しく最もよい結果のための操作指示に続くため。ピペットで移すこと、タイミングおよびクリーニングはプロセス中精密でなければならない。
8)ブルセラ症Agは版にである使い捨て可能、再使用しない塗った。
7. 試験手順
1) 血清の希薄の版で、1:40までに血清、否定的な制御および肯定的な制御を薄くしなさい(例えば:よの195ulサンプル希薄+ 5ul血清のサンプル)、および組合せ;
2)はテスト井戸、20ul/wellにブルセラ症Agに上塗を施してある版を(サンプルに従う要求された量開いた、測定)、加える薄くされた血清を取る;同時に、セット1よく肯定的な制御のためにおよび井戸Addの否定的な制御のための2つの井戸は、それぞれ否定的な制御および薄くされた肯定的な制御、20ul/wellを薄くした;
3)は酵素の共役、80ul/wellを加え、穏やかに揺れ、自己接着で覆い、そして60分の37°Cで孵化する;
4)開いた自己接着ホイルは乾燥するために、井戸の液体を注ぎ、各井戸に薄くされた洗浄緩衝、250ul/wellを加え、液体を注ぎ、4-6回上記のステップを繰り返し、そしてふたを弾くのに最終的に吸収性のペーパーを使用する;
5)は基質、100ul/wellを加え、自己接着と、カバーよく混合し、そして暗闇の15分の37°Cで孵化する;
6)は反作用を停止するために停止解決、50ul/wellを加え10分の結果を測定する。
8. 結果の判断
空白制御井戸はゼロに設定され、450nmのODの価値は読まれる(630nmは参照である)。
働く検出のため:
否定的な制御OD価値(N)>0.5、間rate>80%を妨げる肯定的な価値(p)
計算方法:
PI (妨害率) = {1 (サンプルOD価値/否定的な制御OD平均値)}x 100%
結果の解釈
PI (閉塞率) > 70%:陽性
PI (妨害率)の≤ 70%:陰性
9. 貯蔵および日付切れるため
暗闇の2~8℃、凍結する無しの満期日の店:12か月。
Q1:あなたは出荷するためにどの位の時間を要するか。
A1:通常7仕事日以内の船。
Q2:OEM/ODMを支えるか。
A2:支えることができる。私達はあなたの特定の必要性および特定の量に従ってカスタマイズしてもいい。
Q3:あなたの工場はいかに品質管理の点ではしているか。
A3:私達にISO9001証明があり、ISO13485証明、これまでのところすべての工程、標準的な規則がある、私達は政府の関連した行動そして法律に従う。
Q4:売り上げ後のサービスは保証されるか。
A4:私達は専門のオンライン技術的な売り上げ後のサービスを提供する。プロダクトが実験の間に失敗すれば、私達は提供してもいい
電話、ビデオおよび他の形態を通した1対1の指導。
Q5:あなたの最低順序量は何であるか。
A5:1Kit.
Q6:出荷方法は何であるか。
A6:それは明白によって(FEDERAL EXPRESS、UPS、DHL、EMS、等)または空気および地面によって出荷することができる。順序を置く前に私達と確認しなさい。