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鳥インフルエンザのウイルスの抗体診断ELISAのキット96Wells/Kit ISO9001
1. 導入
鳥インフルエンザ、別名本当の鳥インフルエンザまたはヨーロッパの鳥インフルエンザは、タイプによって引き起こされる激しく、非常に致命的な感染症asymptomatic中毒および激しい伝染性の死によって特徴付けられる鳥インフルエンザのウイルス(AIV)である。
このELISAのキットが鳥インフルエンザのウイルスのタイプを検出するのに鶏、アヒル、七面鳥、ウズラ、ホロホロ鳥、ガチョウおよび他の家禽の血清、血しょうまたは卵黄の抗体使用され、免疫の効果の評価および補助診断に使用することができる。
2. 主義
このキットはAIVの抗原でプリコートしたmicroplates、抗体の使用液、酵素の共役、等を構成される。それは競争ELISAを採用する(ELISAを妨げる)。テストを動かした場合、プリコートされたmicroplateの井戸に薄くされたサンプルおよび抗体の使用液を加えなさい。AIVの抗体がサンプルにあれば、結合からmicroplateのプリコートされたAIVの抗原に抗体の使用液を防ぐ。その結果、次のステップに色反作用がない、他では色反作用がある。サンプルの色の深さはサンプルの特定の抗体の内容に否定的に関連する。停止解決が加えられた後、黄色になるために変わる色。各反作用の吸光度の価値はmicroplateの読者との450 nmでよく測定された。私達はそれから鳥インフルエンザのウイルス(AIVのことを)タイプAの抗体がサンプルにあればかどうか知ってもいい。
3. 部品
コード | 名前 | 1X96T | 2X96T |
1 | AIVの抗原はmicroplateに塗った | 96T×1 | 96T×2 |
2 | 酵素の共役(赤い帽子) | 11ml×1 | 11ml×2 |
3 | 抗体の使用液(ブルー キャップ) | 5.5ml×1 | 11ml×1 |
4 | 20xは洗浄の緩衝を集中した | 40ml×1 | 40ml×1 |
5 | 基質A (白い帽子) | 6ml×1 | 11ml×1 |
6 | 基質B (黒い帽子) | 6ml×1 | 11ml×1 |
7 | 停止しなさい解決(黄色い帽子)を | 6ml×1 | 11ml×1 |
8 | 肯定的な制御(赤い帽子) | 1.0 ml×1 | 1.5 ml×1 |
9 | 否定的な制御(緑の帽子) | 1.0 ml×1 | 1.5 ml×1 |
10 | 付着力ホイル | 1部分 | 2部分 |
11 | 指示 | 1部分 | 1部分 |
4. 必要なが、提供されない材料
1) microplateの読者(を含む450/630 nmの波長)。
2) 調節可能なMicropipettes
3) 37℃一定した温度装置
5. サンプル準備
1) 室温に20xによって集中される洗浄緩衝を戻しなさい(について25°C)使用の前に、沈殿させた塩を分解するために揺すり次に蒸溜されたか、または脱イオンされた水と20xを薄くしなさい。
2) 血清/血しょう:動物の全血を取り、従来の方法に従って血清か血しょうを取りなさい。血清/血しょうは溶血および汚染なしで、明白になるべきである。サンプルは長期保管の短期貯蔵のための2~8°C (1週以内に)および-20°Cで貯えることができる。
卵黄:新しい卵黄の2mlを取り、生理学塩の2mlを加え、15minのための3000r/minで、遠心分離機よく揺すり、そしてサンプルとして上澄みを取りなさい。
3) 薄くされた洗浄緩衝が付いている希薄な血清、血しょうまたは準備された卵黄のサンプル5-fold (例えばサンプルの10ulを薄くされた洗浄緩衝および組合せの40ulによく加えるため)。肯定的で、否定的な制御は希薄を要求しない。
6. 試験手順
1) 使用の前に30分の室温にキットを戻しなさい。
2) microplateの井戸の必須数を取りなさい、2つの否定的な制御井戸を置けば2つの肯定的な制御井戸は2~8°Cで、未使用の井戸および店をできるだけ早く密封する。
3) 否定的な制御は肯定的な制御、50ul/wellに否定的な制御、50ul/wellに、肯定的な制御加えられる加えられる;サンプルは薄くされたサンプル50ul/wellによく加えられる;
4) 各井戸に抗体の使用液、50ul/wellを加えなさい。よく混合し、30分の37°Cで孵化させなさい。
5) 井戸の液体を離れて注ぎなさい、洗浄解決ですべての井戸を満たしなさい、30秒および不用物のために孵化させなさい。洗浄プロシージャを同様に上で5倍繰り返し、乾燥した軽く打ちなさい。
6) 各井戸に酵素の共役、100ul/wellを加えなさい。30分の37°Cで孵化させなさい。
7) 洗浄ステップ5)。
8) 基質Aを加えなさい:よくそれぞれへの50ul/wellは、そして基質Bを加える:50ul/wellは、よく混合し、暗闇の15分の37°Cで孵化する。
9) 停止する解決を加えなさい:井戸ごとの50ul/wellは、使用ELISA読者450nmで各井戸のAの価値を測定するためによく混合し(630nmは参照である)。
7. 結果
1) 通常の状況で、否定的な制御井戸のAの価値は1.0に大きいよりまたは同輩;
2) 通常の状況で、肯定的なよの制御≤のAの価値否定的な制御健康な× 50%のAの価値;
3) PI (妨害率) = (1サンプル価値/否定的な制御平均) X 100%のPIの≥ 50%:陽性;PI < 50="">
4) 非免疫にされた群:プラスの結果は臨床データを伴って分析される必要がある伝染があるかもしれない。
5) 免疫の群:モニターおよび記録現時点でサンプルの抗体のレベル、および群の免疫の状態の抗体のレベルそして変更の配分を結果に従って分析するため。
8. 制限
このキットは質的にAIVの抗体しか検出なできる。強く、中型弱い抗体のレベルはPIの価値に従って大体評価された。
9. ノート
1) 操作の間の摩耗の手袋そして仕事着は、および厳しく消毒および分離システムを実行する。さまざまな実験無駄は汚染物質として扱われるべきである
2) 解決をである腐食性停止しなさい。皮および衣服が付いている接触を避けなさい。接触が起こったら、水道水で洗いなさい。
3) Microplatesは室温の乾燥に冷凍から平衡させるべきである取除き未使用のmicroplatesはdesiccantと密封されるべきである。
4) 洗浄液体は低温で結晶し易く使用されたとき室温で分解する。
5) 十分なしの酵素が洗浄しないことをことを防ぐために各井戸に洗浄緩衝を十分に加えなさい
6) テスト サンプルは新しいべきである。
7) 試験結果の決定はELISAの読者に基づいていなければならない。
8) 異なったバッチからの試薬を混合してはいけない。
指定:5X96、2X96の1X96穴/キット。
妥当性:12か月。
貯蔵:2-8℃はライトから、保つ。
パッケージを開けた後2か月間湿気からの2-8°Cでmicroplatesを、貯えなさい。
Q1:あなたは出荷するためにどの位の時間を要するか。
A1:通常7仕事日以内の船。
Q2:OEM/ODMを支えるか。
A2:支えることができる。私達はあなたの特定の必要性および特定の量に従ってカスタマイズしてもいい。
Q3:あなたの工場はいかに品質管理の点ではしているか。
A3:私達にISO9001証明があり、ISO13485証明、これまでのところすべての工程、標準的な規則がある、私達は政府の関連した行動そして法律に従う。
Q4:売り上げ後のサービスは保証されるか。
A4:私達は専門のオンライン技術的な売り上げ後のサービスを提供する。プロダクトが実験の間に失敗すれば、私達は提供してもいい
電話、ビデオおよび他の形態を通した1対1の指導。
Q5:あなたの最低順序量は何であるか。
A5:1Kit.
Q6:出荷方法は何であるか。
A6:それは明白によって(FEDERAL EXPRESS、UPS、DHL、EMS、等)または空気および地面によって出荷することができる。順序を置く前に私達と確認しなさい。